摘要目的 研究表明微核糖核酸(microRNA,MiRNA)和Kruppel样因子10(Kruppel-like factor10,KLF10)调控骨质疏松症的进程.研究旨在探讨miR-26b/KLF10信号调控骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)分化的机制.方法 流失鉴定分离的大鼠BMSCs,不同剂量的补肾活血方处理BMSCs,检测其[1-2]增殖能力,碱性磷酸酶活性和茜素红染色检测BMSCs的成骨分化潜能.qPCR检测不同剂量的补肾活血方处理BMSCs后,miR-26b 和 KLF10 的表达水平.mirtarBase 数据库检测 KLF10 mRNA 的 3'非翻译区(untranslated regions,3'UTR)上是否有miR-26b的结合位点,双荧光素酶报告实验检测miR-26b对KLF10启动子活性的影响.qPCR检测miR-26b/KLF10信号对BMSCs增殖和成骨分化标志物的表达的影响.Western blot检查Wnt/β-catenin信号是否被激活.结果 流式分析显示分离的原代细胞大部分是BMSCs.补肾活血方显著促进骨髓间充质干细胞的增殖,补肾活血方显著提高了 BMSCs中碱性磷酸酶的水平和成骨分化的潜能.补肾活血方促进BMSCs中miR-26b和KLF10的表达.在KLF10 mRNA的3'UTR上有miR-26b的结合位点.在BMSCs中,miR-26b抑制KLF10的3'UTR荧光素酶活性.此外,miR-26b 也抑制了 KLF10 的表达水平.CCK8(Cell Counting Kit-8)显示 KLF10 促进 BMSCs 增殖,qPCR 显示 miR-26b显著抑制成骨分化标志物的表达.而KLF10能够逆转miR-26b的抑制效应,提示miR-26b/KLF10信号介导了补肾活血方在BMSCs增殖和成骨分化中的效应,且补肾活血方通过激活Wnt/β-Catenin信号通路促进成骨.结论 补肾活血方促进BMSCs的成骨由miR-26b/KLF10/Wnt/β-Catenin信号轴调控.