基于NF-κB信号通路探讨当归多糖对LPS介导的SD大鼠骨性关节炎作用研究
Effect of Angelica Sinensis Polysaccharide on LPS Mediated Osteoarthritis in SD Rats Based on NF-κB Signaling Pathway
摘要目的 探究当归多糖(Angelica sinensis polysaccharides,ASP)对骨关节炎软骨细胞的软骨保护和治疗作用.方法 通过体外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导来构建关节炎软骨细胞,使用CCK-8法(Cell Counting Kit-8 assay,CCK-8)筛选出实验组当归多糖的剂量,通过活死细胞染色、DNA和糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量检测、实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测、酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫荧光染色、番红0固绿及免疫组化染色等来探究当归多糖对关节炎性软骨细胞的保护和治疗效果.结果 CCK-8成功筛选出25 μg/mL的当归多糖作为实验组.活死细胞染色中实验组细胞活力较模型组好,且实验组DNA含量和GAG分泌量均显著高于模型组(P<0.05).PCR中实验组的炎症相关基因相对表达量较模型组显著下调(P<0.05),而软骨相关基因相对表达量显著上调(P<0.05).Elisa显示实验组肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的分泌水平低于模型组(P<0.05),体内免疫组化染色进一步验证了当归多糖实验组的P65(NF-κB P65)、iNOS及MMP13免疫组化中实验组的阳性表达显著低于模型组.结论 当归多糖通过抑制NF-κB信号通路的表达对LPS诱导的骨性关节炎具有一定的治疗作用.
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