小檗碱基于AMPK/mTOR通路对EC9706细胞能量代谢的影响
Effect of Berberine on Energy Metabolism in EC9706 Cells Based on AMPK/mTOR Pathway
摘要目的 通过观察小檗碱对EC9706细胞能量代谢及相关通路的影响从而探究其机制.方法 常规培养细胞,MTT法筛药,选择15、30 μg/mL两个质量浓度,通过流式细胞术检测细胞周期、凋亡水平,能量代谢分析系统检测细胞糖酵解潜能及线粒体呼吸能力,蛋白质印迹实验探究细胞中p-AMPK/AMPK及下游p-mTOR/mTOR蛋白表达水平变化,通过荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)在基因水平上验证AMPK及下游mTOR的表达水平.结果 小檗碱能够明显抑制EC9706细胞增殖(P<0.01),促进EC9706细胞凋亡(P<0.05),与对照组相比,小檗碱加药组GO/G1期明显降低(P<0.05),S期占比明显升高(P<0.01).小檗碱能够抑制EC9706细胞的糖酵解潜能及线粒体呼吸能力(P<0.01)且具有浓度依赖性.小檗碱能够促进p-AMPK/AMPK(P<0.01)并抑制p-mTOR/mTOR蛋白表达(P<0.05).在基因水平上,小檗碱促进了 AMPK表达(P<0.05),同时促进了 mTOR的表达(P<0.01).结论 小檗碱可以通过能量代谢途径抑制食管癌EC9706细胞的增殖,促进食管癌细胞凋亡并阻碍其分裂.
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