摘要目的 研究六君子汤改善肿瘤环境下C2C12成肌细胞分化的分子机制,为健脾和胃法治疗肿瘤恶病质肌肉萎缩提供实验基础.方法 诱导成肌细胞C2C12分化,倒置显微镜观察分化后肌管长度;成肌细胞C2C12与肺癌细胞Lew-is 共培养,分为空白组、模型组、叉头框蛋白O1(forkhead box protein O1,FoxO1)抑制剂组、六君子汤组、联合用药组,蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测C2C12细胞成肌分化抗原(myogenic differentiation antigen,MyoD)的表达及与过氧化物酶体增殖物受体γ 辅助激活因子 α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha,PGC-1α)/FoxO1通路相关的蛋白表达;电子显微镜观察C2C12细胞线粒体数量及超微结构的变化;流式细胞术(flow cytometry,FCM)观测C2C12细胞线粒体膜电位的变化;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)法检测C2C12细胞PGC-1α/FoxO 1通路相关分子mRNA.结果 C2C12细胞于分化48h肌管横径最长;与空白组比,模型组C2C12细胞MyoD蛋白表达明显减少(P＜0.05),线粒体数量减少(P＜0.05),线粒体双层膜皱曲不清晰甚至呈C形或基质肿胀,线粒体嵴数量减少、排列紊乱、断裂或溶解消失成空泡状,线粒体膜电位降低,细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),线粒体转录因子 A(mitochondrial transcription factor A,tFAM)的 mRNA 表达明显降低(P＜0.05),FoxO1 蛋白表达明显增高,PGC-1α、脂肪和肥胖相关基因(fat mass and obesity-associated gene,FTO)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、tFAM蛋白表达明显减少(P＜0.05);与模型组比较,六君子汤组C2C12细胞MyoD蛋白表达明显增高,FoxO1抑制剂组、六君子汤组、联合用药组中C2C12细胞线粒体数量显著增多(P＜0.05),线粒体双层膜结构正常,线粒体膜电位升高,细胞凋亡率显著降低(P＜0.05),联合用药组C2C12细胞mTOR和tFAM mRNA表达明显增加(P＜0.05),FoxO1抑制剂组、六君子汤组及联合用药组中C2C12细胞FoxO1蛋白表达明显减少,PGC-1α、FTO、mTOR、tFAM蛋白表达明显增高(P＜0.05);与六君子汤组比较,联合用药组C2C12细胞PGC-1α蛋白表达升高(P＜0.05).结论 六君子汤通过调控PGC-1α/FoxO1信号通路,能维持线粒体功能,改善肿瘤环境下成肌细胞分化.