基于巨噬细胞和斑马鱼炎症模型研究地肤子总黄酮的抗炎机制
Anti-inflammatory Mechanism of Total Flavonoids from Kochiae Fructus Based on Macrophage and Zebrafish Inflammation Models
摘要目的:研究地肤子总黄酮对巨噬细胞炎症模型、斑马鱼皮肤炎症的作用,探讨其抗炎机制.方法:通过体外建立LPS诱导RAW264.7巨噬细胞模型和体内建立SLS诱导斑马鱼皮肤炎症模型,采用CCK-8法检测不同浓度地肤子总黄酮处理的巨噬细胞存活率,ELISA法检测地肤子总黄酮处理巨噬细胞分泌炎性因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和IFN-γ的水平变化,采用荧光显微观察斑马鱼皮肤中性粒细胞募集情况,评价地肤子总黄酮对斑马鱼炎症模型的作用.结果:细胞实验结果显示,100 μg/mL地肤子总黄酮对正常巨噬细胞及LPS诱导的巨噬细胞均有显著的抑制作用,用地肤子总黄酮处理12 h后,巨噬细胞中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ以及IL-8的表达量均显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001);斑马鱼实验结果显示,与正常对照组相比,SLS诱导模型组斑马鱼背部和腹部皮肤中性粒细胞数量显著增加(P<0.001),表现出明显的中性粒细胞迁移,50、100、200 μg/mL地肤子总黄酮处理后,能显著抑制中性粒细胞迁移,且呈剂量依赖性.结论:地肤子总黄酮通过抑制巨噬细胞的生长、巨噬细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ以及IL-8的表达和中性粒细胞的迁移抑制表皮炎症浸润,从而发挥抗炎作用.
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