摘要目的:观察益肾养髓方对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemia-reperfusion injury,SCII)的影响,并分析其作用机制.方法:将56只SPF级雌性SD大鼠随机分为7组,每组8只.压迫组、生理盐水组、甲强龙组及益肾养髓方各浓度组,通过在C6～7椎间隙植入吸水膨胀材料进行脊髓压迫造模,假手术组将压迫材料植入30 s后取出.压迫手术结束4周后,生理盐水组、甲强龙组及益肾养髓方各浓度组取出压迫材料进行减压,压迫组在移除压迫材料30 s后再次放入,假手术组仅咬除相应位置相同大小的椎板.减压手术前1周,益肾养髓方高、中、低浓度组分别按16.74 g·kg-1、8.37 g·kg-1和4.19 g·kg-1以益肾养髓方药液灌胃(上述药物剂量为生药量),每天1次,连续2周;假手术组、压迫组和生理盐水组均按0.01 mL·g-1灌服生理盐水.甲强龙组在减压手术前30 min和术后1周,分别进行1次甲泼尼龙琥珀酸钠尾静脉注射,给药量为30 mg·kg-1.减压手术中,采用激光散斑血流成像系统检测生理盐水组大鼠的脊髓局部血流量;压迫后1周和干预结束后,采用纤维丝机械刺激法测定大鼠机械痛阈值,采用推拉力计测定大鼠前爪抓力;干预结束后,采用ELISA技术测定大鼠血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)抑制率及丙二醛(malondialdehyde,MDA)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,取大鼠C5～C7节段脊髓组织采用HE染色进行病理学观察,并采用免疫荧光技术检测脊髓组织中8-羟基鸟嘌呤(8-oxoguanine,8-oxoG)阳性率.结果:①脊髓局部血流量测定结果.与减压前相比,减压后10 min生理盐水组大鼠的脊髓局部血流量增大(t=6.562,P=0.005).②机械痛阈值测定结果.压迫后1周,压迫组、生理盐水组、益肾养髓方各浓度组及甲强龙组的机械痛阈值均低于假手术组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000).干预结束后,益肾养髓方各浓度组及甲强龙组的机械痛阈值均高于压迫组(P=0.019,P=0.032,P=0.011,P=0.011),生理盐水组与压迫组机械痛阈值的差异无统计学意义;益肾养髓方各浓度组及甲强龙组与生理盐水组机械痛阈值的组间差异均无统计学意义;益肾养髓方各浓度组及甲强龙组机械痛阈值的组间差异均无统计学意义.③前爪抓力测定结果.压迫后1周,压迫组、生理盐水组、益肾养髓方各浓度组及甲强龙组的前爪抓力均低于假手术组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000).干预结束后,生理盐水组、益肾养髓方各浓度组及甲强龙组的前爪抓力均高于压迫组(P=0.000,P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000);益肾养髓方各浓度组及甲强龙组的前爪抓力均高于生理盐水组(P=0.033,P=0.005,P=0.003,P=0.000);益肾养髓方各浓度组及甲强龙组前爪抓力的组间差异均无统计学意义.④血清SOD抑制率测定结果.假手术组的血清SOD抑制率高于压迫组(P=0.000);假手术组、益肾养髓方中浓度组、益肾养髓方低浓度组、甲强龙组的血清SOD抑制率均高于生理盐水组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.008),压迫组、益肾养髓方高浓度组与生理盐水组血清SOD抑制率的组间差异均无统计学意义;益肾养髓方各浓度组与甲强龙组血清SOD抑制率的组间差异均无统计学意义;益肾养髓方高浓度的血清SOD抑制率高于中浓度组(P=0.048),益肾养髓方高、中浓度组与低浓度组血清SOD抑制率的组间差异均无统计学意义.⑤血清MDA含量.假手术组的血清MDA含量低于压迫组(P=0.037);假手术组和益肾养髓方中浓度组的血清MDA含量均低于生理盐水组(P=0.000,P=0.011),压迫组、益肾养髓方高浓度组、益肾养髓方低浓度组、甲强龙组与生理盐水组血清MDA含量的组间差异均无统计学意义;益肾养髓方各浓度组及甲强龙组血清MDA含量的组间差异均无统计学意义.⑥血清IL-6含量.假手术组与压迫组血清IL-6含量的差异无统计学意义;假手术组、压迫组、益肾养髓方各浓度组及甲强龙组的血清IL-6含量均低于生理盐水组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);益肾养髓方高、低浓度组的血清IL-6含量均高于甲强龙组(P=0.029,P=0.033),益肾养髓方中浓度组与甲强龙组血清IL-6含量的差异无统计学意义;益肾养髓方各浓度组血清IL-6含量的组间差异均无统计学意义.⑦血清TNF-α含量.假手术组的血清TNF-α含量低于压迫组(P=0.001);假手术组、压迫组、益肾养髓方中浓度组、益肾养髓方低浓度组、甲强龙组的血清TNF-α含量均低于生理盐水组(P=0.043,P=0.033,P=0.006,P=0.001,P=0.022),益肾养髓方高浓度组与生理盐水组血清TNF-α含量的差异无统计学意义;益肾养髓方各浓度组及甲强龙组血清TNF-α含量的组间差异均无统计学意义.⑧脊髓组织病理学观察结果.假手术组脊髓组织中细胞形态基本无改变,未见神经元胞体肿胀、细胞核固缩等病理表现;压迫组脊髓组织中可见大量瘢痕组织及空泡样改变,并可见部分神经元损伤;生理盐水组脊髓组织中部分区域可见瘢痕组织及空泡样改变,并可见部分神经元形态改变;益肾养髓方各浓度组空泡样改变及瘢痕较压迫组和生理盐水组明显减少,神经元细胞核局限性固缩、散在或游离分布,细胞形态逐渐恢复;甲强龙组脊髓组织中可见神经元胞体膨大,细胞核固缩.⑨脊髓组织中8-oxoG阳性率检测结果.假手术组与压迫组8-oxoG阳性率的差异无统计学意义;假手术组、压迫组、益肾养髓方各浓度组及甲强龙组的8-oxoG阳性率均低于生理盐水组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);益肾养髓方各浓度组的8-oxoG阳性率均低于甲强龙组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);益肾养髓方各浓度组8-oxoG阳性率的组间差异均无统计学意义.结论:益肾养髓方对大鼠SCII具有治疗作用,其机制可能与其能够减少神经元氧化损伤有关.