摘要目的:探讨独活-秦艽对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠的影响及其作用机制.方法:将56只雄性SD大鼠随机分为7组,每组8只.空白组大鼠膝关节腔注射生理盐水,其余各组均通过向膝关节腔注射碘乙酸钠溶液进行KOA造模.造模后第7天开始,塞来昔布组按0.018 g·kg-1以塞来昔布药液灌胃,独活-秦艽低、高剂量组分别按2.1 g·kg-1(生药量)、4.2 g·kg-1(生药量)以独活-秦艽药液灌胃,独活-秦艽多糖组、独活-秦艽上清液组分别以提取的独活-秦艽多糖和独活-秦艽上清液灌胃,空白组和模型组以等量生理盐水灌胃.药物干预每天1次,持续4周.造模前后测量各组大鼠膝关节直径差(造模后直径-造模前直径);药物干预结束后取大鼠膝关节,HE染色后进行组织病理学观察;取大鼠腹主动脉血,采用ELISA技术检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、基质金属蛋白酶(matrix metallopro-teinase,MMP)-1、MMP-3、MMP-13含量;收集大鼠粪便,采用16S核糖体DNA测序观察肠道菌群变化.结果:①膝关节直径差测量结果.造模后第7天,空白组的膝关节直径差小于其余6 组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000).造模后第14天,塞来昔布组的膝关节直径差小于模型组(P=0.044).②膝关节病理组织学观察结果.模型组的改良Mankin's评分高于空白组、塞来昔布组及独活-秦艽高剂量组、多糖组、上清液组(P=0.000,P=0.003,P=0.003,P=0.000,P=0.000);塞来昔布组的改良Mankin's评分高于独活-秦艽高剂量组(P=0.044);独活-秦艽低剂量组的改良Mankin's评分高于独活-秦艽高剂量组、多糖组、上清液组(P=0.000,P=0.003,P=0.012).③血清TNF-α含量检测结果.空白组、塞来昔布组、独活-秦艽高剂量组、独活-秦艽上清液组的血清TNF-α含量均低于模型组(P=0.038,P=0.016,P=0.016,P=0.016);塞来昔布组、独活-秦艽高剂量组、独活-秦艽上清液组的血清TNF-α含量均低于独活-秦艽低剂量组、多糖组(P=0.029,P=0.034;P=0.000,P=0.000;P=0.008,P=0.009).④血清IL-6含量检测结果.空白组、塞来昔布组、独活-秦艽高剂量组、独活-秦艽上清液组的血清IL-6含量均低于模型组(P=0.012,P=0.000,P=0.000,P=0.000);塞来昔布组、独活-秦艽上清液组的血清IL-6含量均低于独活-秦艽低剂量组、多糖组(P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000);独活-秦艽高剂量组的血清IL-6含量低于低剂量组、多糖组、上清液组(P=0.000,P=0.000,P=0.028).⑤血清IL-10含量检测结果.空白组、塞来昔布组、独活-秦艽高剂量组、独活-秦艽上清液组的血清IL-10含量均高于模型组(P=0.001,P=0.001,P=0.000,P=0.000);塞来昔布组的血清IL-10含量高于独活-秦艽多糖组(P=0.000);独活-秦艽高剂量组、上清液组的血清IL-10含量均高于低剂量组、多糖组(P=0.010,P=0.000;P=0.000,P=0.000);独活-秦艽低剂量组的血清IL-10含量高于多糖组(P=0.004).⑥血清MMP-1含量检测结果.空白组、塞来昔布组、独活-秦艽高剂量组、独活-秦艽上清液组的血清MMP-1含量均低于模型组(P=0.000,P=0.000,P=0.001,P=0.000);塞来昔布组的血清MMP-1含量低于独活-秦艽低剂量组、多糖组(P=0.005,P=0.017);独活-秦艽上清液组的血清MMP-1含量低于低剂量组、高剂量组、多糖组(P=0.001,P=0.022,P=0.004).⑦血清MMP-3含量检测结果.空白组、塞来昔布组、独活-秦艽上清液组的血清MMP-3含量均低于模型组(P=0.041,P=0.003,P=0.000);塞来昔布组的血清MMP-3含量低于独活-秦艽低剂量组、多糖组(P=0.011,P=0.047);独活-秦艽上清液组的血清MMP-3含量低于低剂量组、高剂量组、多糖组(P=0.000,P=0.005,P=0.000).⑧血清MMP-13含量检测结果.空白组、塞来昔布组、独活-秦艽高剂量组、独活-秦艽上清液组的血清MMP-13含量均低于模型组(P=0.000,P=0.007,P=0.000,P=0.001);独活-秦艽高剂量组、上清液组的血清MMP-13含量均低于低剂量组、多糖组(P=0.000,P=0.000;P=0.021,P=0.002).⑨肠道菌群分析结果.Alpha多样性分析结果显示,7组大鼠肠道菌群的Chao1指数和Shannon指数总体比较,差异均无统计学意义.Beta多样性分析结果显示,各组肠道菌群组成的组间差异大于组内差异(R2=0.369,P=0.014).物种组成及LEfSe分析结果显示,在门水平上,与模型组相比,独活-秦艽高剂量组和独活-秦艽上清液组Firmicutes相对丰度均增加、Bacteroidota相对丰度均降低.在属水平上,与模型组相比,独活-秦艽低剂量组、高剂量组、多糖组及上清液组 norank_f_Muribaculaceae、UCG-005、Blautia 相对丰度均增加,norank_o__Clostridia_UCG-014(除独活-秦艽上清液组外)、Romboutsia相对丰度均降低;与模型组相比,塞来昔布组和独活-秦艽高剂量组Lactobacillus相对丰度均增加,塞来昔布组Blautia相对丰度增加.结论:独活-秦艽可减轻KOA模型大鼠炎症反应、保护关节软骨,其有效成分可能存在于上清液中;其作用机制可能与增加 norank_f_Muribaculaceae、Lactobacillus、UCG-005、Blautia 相对丰度,降低 norank_o__Clostridia_UCG-014、Romboutsia相对丰度有关.