乌头原碱对小鼠成肌细胞增殖活性和成肌分化影响的实验研究
Effects of aconitine on the proliferative activity and myogenic differentiation of myoblasts in mice:an experi-mental study
摘要目的:观察乌头原碱对小鼠成肌细胞增殖活性和成肌分化的影响.方法:①乌头原碱对小鼠成肌细胞C2C12增殖活性影响的检测.将培养的小鼠成肌细胞C2C12分为5组(空白组、5 μmol·L-1组、10 μmol·L-1组、20 μmol·L-1组、40 μmol·L-1组),除空白组外,其他4组分别加入相应浓度的乌头原碱进行干预,计算各组细胞的增殖率,并筛选乌头原碱最佳干预浓度.②乌头原碱对小鼠成肌细胞C2C12成肌分化影响的检测.将培养的小鼠成肌细胞C2C12分为对照组和乌头原碱组.对照组加入马血清,乌头原碱组加入马血清和最佳干预浓度的乌头原碱进行干预.干预2 d和4 d后,分别采用逆转录PCR和Western Blot法检测2组小鼠成肌细胞C2C12中肌生成分化因子1(myogenic differentiation 1,MyoD1)、肌生成素(myogenin,MyoG)、肌球蛋白重链(myosin heavy chains,MyHC)的mRNA及蛋白表达水平;并采用免疫荧光法检测2组小鼠成肌细胞C2C12中MyHC阳性表达情况,计算肌管融合指数.结果:①乌头原碱对小鼠成肌细胞C2C12增殖活性影响的检测结果.10 μmol·L-1、20 μmol·L-1、40 μmol·L-1组小鼠成肌细胞C2C12的细胞增殖率均高于空白组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);5 μmol·L-1组的细胞增殖率与空白组相比,差异无统计学意义(P=0.806);20 μmol·L-1组的细胞增殖率高于10 μmol·L-1和40 μmol·L-1组(P=0.011,P=0.037).②乌头原碱对小鼠成肌细胞C2C12成肌分化影响的检测结果.干预2 d和4 d后,乌头原碱组小鼠成肌细胞C2C12中MyoD1、MyoG、MyHC的mRNA和蛋白相对表达量及肌管融合指数均高于对照组(P值均>0.05).结论:乌头原碱可增强小鼠成肌细胞的增殖活性,且可上调小鼠成肌细胞成肌分化相关基因的表达,促进其成肌分化.
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