摘要目的 本研究通过蛋白质组学(data independent acquisition,DIA)和生物信息学分析,探讨针刺缓解癌症相关疼痛(cancer related pain,CRP)的潜在机制.方法 在广东省6家医院开展一项随机对照试验,将纳入的中重度疼痛的癌症患者通过中央随机方法分为针刺组和假针刺组各9例.针刺组和假针刺组均口服盐酸羟考酮缓释片止痛,同时在3周内接受7次针刺/假针刺治疗,每周2次～3次,随访时间为4周.使用数字评分量表(numeric rating scale,NRS)对患者的疼痛情况进行记录,包括最严重疼痛评分、平均疼痛评分、目前的疼痛评分和阿片类药物使用总剂量.收集2组患者治疗前后的外周血样本,进一步进行血清蛋白组学检测,使用差异表达分析确定关键的差异表达蛋白(differential expression proteins,DEPs).通过基因集合富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)、基因本体论(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)功能富集分析,明确针刺可能调控的生物学途径.通过加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)确定了与最严重疼痛评分、平均疼痛评分、目前的疼痛评分和阿片类药物使用总剂量关系最密切的模块基因.通过蛋白质互作(protein protein interaction,PPI)网络确定核心的靶点.最后,通过对蛋白表达进行趋势化分析,明确针刺与假针刺在调控CRP方面的差异和潜在机制.结果 针刺组对比假针刺组可显著降低癌症患者的最严重疼痛评分(P＜0.05).针刺组和假针刺组治疗前后共获得外周血样本36份,DEPs分析显示针刺干预后可显著上调84个蛋白,下调10个蛋白.GSEA富集分析显示针刺可显著下调趋化因子的分泌、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)的产生和急性炎症反应通路.84个上调蛋白的KEGG富集分析显示针刺能够上调免疫反应和免疫效应过程,10个下调蛋白的KEGG富集分析显示针刺能够下调补体成分C1q结合水解酶活性和补体结合.WGCNA分析确定了蓝色模块为关键的模块,该模块的基因与最严重疼痛评分显著正相关,GO功能富集分析显示这些基因在C1q结合水解酶活性和补体结合信号通路中富集.蛋白表达的趋势分析显示,Cluster 5基因簇在针刺和假针刺组基线平衡,在假针刺后显著上调,而在针刺后处于基线与假针刺干预后之间的水平,进一步的分析发现这些基因与Ras相关蛋白1(Ras-related protein 1,RAP1)信号通路密切相关.结论 针刺对比假针刺能够降低癌症患者的最严重疼痛评分.针刺能够减轻CRP患者的炎症水平,增强免疫,可能与RAP1等信号通路密切相关.