补肾舒脊颗粒含药血清对人骨髓间充质干细胞Wnt5a、β-catenin mRNA及蛋白表达的影响

Effect of Bushen Shuji Granules（补肾舒脊颗粒）Drug Containing Serum on mRNA and Protein Expressions of Wnt5a and β-catenin in Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

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摘要目的探讨补肾舒脊颗粒延缓异位骨化的可能作用机制.方法体外培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分为空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组.空白组加入基础培养基(3.8ml)+5％正常大鼠血清(0.2ml);模型组加入诱导培养基(4.8ml)+5％正常大鼠血清(0.2ml);西药组加入诱导培养基(3.8 ml)+5％洛索洛芬钠含药血清(0.2 ml);中药高、中、低剂量组分别加入诱导培养基(3.8 ml)+5％补肾舒脊颗粒含药血清(0.2ml).28天后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白表达.结果与空白组比较,模型组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均升高(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,对照组和中药各剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均降低(P＜0.05或P＜0.01);与对照组比较,中药高剂量组Wnt5amRNA、β-catenin mRNA表达降低,中药中剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01);与中药低、中剂量组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低(P＜0.05或P＜0.01).与中药低剂量组比较,中药中剂量组Wnt5a蛋白表达降低,中药高剂量组β-catenin蛋白表达升高(P＜0.05). 结论补肾舒脊颗粒可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白的表达,从而起到延缓强直性脊柱炎异位骨化的作用.