3D打印海藻酸钠-明胶皮肤支架及其与成纤维细胞的体外生物相容性研究
3D printing of SA-gelatin scaffolds and its biocompatibility on fibroblasts in vitro
摘要目的 利用3D打印技术将海藻酸钠(SA)与明胶制备成不同规格的SA-明胶皮肤支架,评价其生物相容性及对大鼠皮肤成纤维细胞生物学行为的影响.方法 采用挤压式3D打印技术,将3%、4%、5%的SA与明胶制成生物墨水,打印获得不同规格的SA-明胶皮肤支架.通过扫描电镜观察其形态结构;将大鼠皮肤成纤维细胞与其共培养,于第2天进行Live/Dead染色观察皮肤支架表面细胞生长状态,第5天扫描电镜观察细胞生长黏附情况及形态,第1、3、5天使用CCK-8法检测细胞增殖情况,第1、2、3天检测胶原蛋白及IL-6的表达水平.结果 扫描电镜观察显示,3组皮肤支架均为多孔网状立体结构,且孔隙均匀,3%SA组皮肤支架的表面较另2组明显粗糙.Live/Dead染色结果表明,细胞在3组皮肤支架表面均能较好地粘附与生长,但5%SA组细胞数量少于另外两组;扫描电镜下,可见细胞能在皮肤支架表面粘附与生长,且4%SA组细胞数量多于另2组.CCK-8检测结果表明,4%SA组细胞增殖率显著高于另2组(P<0.05).4%SA组的胶原蛋白分泌量显著高于另2组(P<0.05);其IL-6表达水平则明显低于另2组(P<0.05).结论 4%SA-明胶的皮肤支架具有较好的生物相容性和胶原蛋白分泌效应,并可降低IL-6的表达水平,从而有效抑制炎症反应的发生,有望为创面修复提供一种可降解的3D打印皮肤支架.
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