基于DLP的3D打印仿生支架负载ADSC-EVs修复长骨缺损的实验研究
Experimental research of long bone defect repair using biomimetic scaffold constructed via DLP 3D printing loaded with ADSC extracellular vesicles
摘要目的 探究负载脂肪干细胞细胞外囊泡(Adipose stem cell extracellular vesicles,ADSC-EVs)的3D打印仿生骨支架对长骨缺损的修复作用.方法 通过数字光处理(Digital light processing,DLP)3D打印机,制备聚己内酯三丙烯酸酯(Polycaprolactone triacrylate,PCLTA)高精度仿生骨支架,滴加ADSC-EVs于支架表面,扫描电镜下观察支架上的囊泡形态,鬼笔环肽与茜素红染色检测支架的细胞相容性与成骨能力.兔双侧前肢桡骨制备长15 mm的临界骨缺损,随机分3组:空白组不植入支架,对照组植入纯材料支架,实验组植入滴覆ADSC-EVs的支架.植入后12周取材,通过X线片、免疫组化切片染色,观察成骨与成血管效果.结果 鬼笔环肽染色可见细胞在支架表面均匀生长,细胞形态正常.茜素红染色显示滴覆囊泡的支架具有更强的成骨诱导能力(P<0.05).扫描电镜下见囊泡均匀负载于支架表面及内部.X线片显示实验组缺损区域新骨形成速度与成骨量均优于对照组(P<0.05)与空白组(P<0.01),HE染色进一步证实了X线片的结果.免疫组化染色显示,实验组血管内皮细胞特异性标记CD31阳性表达高于对照组(P<0.05)与空白组(P<0.01).结论 负载ADSC-EVs的PCLTA高仿生骨支架具有良好的促成骨与促血管化能力,可有效促进长骨缺损的修复.
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