检索历史 清除

摘要目的：<br>　　明确雷公藤红素对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及相关作用机制。<br>　　方法：<br>　　MTT比色法检测不同浓度、不同作用时间的雷公藤红素对人骨肉瘤细胞增殖的作用；Hoechst33258染色荧光倒置显微镜下观察不同浓度雷公藤红素作用下人骨肉瘤细胞形态的变化；流式细胞技术检测不同浓度雷公藤红素对人骨肉瘤细胞凋亡的影响；Westernblot检测不同浓度雷公藤红素作用下人骨肉瘤细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,caspase-3,caspase-8,procaspase-9,cytochromec和PARP的表达情况。<br>　　结果：<br>　　MTT比色法结果显示，雷公藤红素可显著抑制人骨肉瘤细胞（MG-63,U-2OS及HOS）的增殖，其抑制效应呈现浓度依赖性和时间依赖性。通过绘制细胞生长曲线发现雷公藤红素对人骨肉瘤U-2OS细胞的增殖抑制作用最为明显；Hoechst33258染色荧光倒置显微镜下观察发现随着雷公藤红素作用浓度的升高，人骨肉瘤U-2OS细胞内出现明显的核浓缩、核膜核仁破碎等典型的细胞凋亡形态变化；流式细胞技术检测提示，雷公藤红素可提高人骨肉瘤U-2OS细胞的凋亡率，并呈现浓度依赖性；Westernblot检测发现随着雷公藤红素作用浓度的升高，人骨肉瘤U-2OS细胞内线粒体凋亡途径相关蛋白表达量均发生了显著变化：Bax/Bcl-2比值升高，procaspase-9表达量下降，cytochromec表达量升高，而死亡受体凋亡途径相关蛋白caspase-8表达量无明显变化。细胞凋亡过程中的重要执行蛋白caspase-3出现显著的剪切活化，细胞凋亡底物PARP被剪切降解。<br>　　结论：<br>　　1．雷公藤红素可诱导人骨肉瘤细胞凋亡并抑制细胞增殖；<br>　　2．雷公藤红素通过线粒体途径诱导人骨肉瘤细胞凋亡。