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运用分子印迹及液液萃取技术分析茶枝柑中活性成分和马铃薯中毒性成分的研究

摘要食品和药品分析中由于待测组分含量很低、样品基质很复杂、干扰物质较多等问题,通常需要采用合适的前处理技术对待测组分进行分离和富集,最大限度地浓缩目标化合物,将分析中杂质的干扰降到最低,从而为分析结果的精密度和准确度提供保障。随着分析研究工作的高速发展,人们对样品前处理技术的要求也越来越高,开发出快速、简便、高效、易于自动化的样品前处理方法是广大分析研究人员共同追求的终极目标。传统的样品前处理方法主要包括液液萃取、固相萃取等,这些方法存在着特异性选择能力差的缺陷,而分子印迹技术可克服上述方法的缺陷。因此,本研究探索了分子印迹技术在茶枝柑果肉中活性成分提取和分离中的应用,同时,本文还研究了传统的样品前处理方法液液萃取在马铃薯中毒性成分分析中的应用。<br>  本论文分为以下四个部分,主要内容如下:<br>  第一章全面归纳总结各种样品前处理方法,重点介绍了分子印迹技术的历史起源、基本原理,并对分子印迹聚合物的分类、制备方式、表征手段及其应用领域进行系统地归纳和总结。在此基础之上,指出了本研究工作的目的和意义。<br>  第二章以橙皮素为模板分子,丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,甲苯与十二醇混合溶剂为致孔剂,通过原位聚合法制备出橙皮素分子印迹聚合物。本章重点考察了模板分子、功能单体以及交联剂之间的摩尔比,同时还对不同种类和比例的致孔溶剂进行了研究,以获得制备橙皮素分子印迹聚合物的最佳合成条件。结果显示,模板分子:功能单体:交联剂的最佳摩尔比为1:2:40,混合致孔剂的构成为甲醇、甲苯和十二醇,其中甲苯的含量为20%(v/v)。通过红外光谱、扫描电镜以及选择性吸附实验对制备的橙皮素分子印迹聚合物进行了系统表征和特异性识别能力考察,实验结果表明橙皮素分子印迹整体柱成功制备,且该整体柱对橙皮素分子具有较高的特异性吸附能力。将该整体柱作为固相萃取小柱处理茶枝柑果肉提取物,并使用高效液相色谱仪对萃取后的溶液进行含量测定,计算出橙皮素的回收率为90.8%±3.2(n=3)。说明该整体柱对橙皮素分子具有很好的选择性识别性能,可用于橙皮素的分离和纯化。<br>  第三章建立了一种液液萃取-高效液相色谱法检测马铃薯中α-茄碱含量的新方法。该方法首先选用乙酸提取马铃薯中的α-茄碱,然后用饱和的异丁醇萃取乙酸提取液,最后利用高效液相色谱法对萃取液中α-茄碱进行含量测定。液相色谱分离采用Discovery C18色谱柱(150×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(22:78)为流动相,紫外检测波长为210 nm,色谱柱柱温为30 ℃,进样量为20μL。方法学评估结果表明在0.02~1.00 mg/mL的浓度范围内,α-茄碱的浓度与峰面积成良好的线性关系,相关系数为0.9997;检测限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.68μg/mL和2.27μg/mL;高、中、低三个不同浓度水平的加标回收率为98.0~116.0%。日内和日间精密度的RSD为0.16~1.79%。该方法简便、快速、精密度和准确度高,适用于快速检测马铃薯中的α-茄碱含量。<br>  第四章对全文进行了总结,并在此基础上对未来研究工作进行了展望。

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