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SLE患者CD4+T细胞中miR326与Ets-1表达水平与Th17细胞比例的相关性研究及临床意义

摘要目的:检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者CD4+T细胞中miR326与Ets-1 mRNA的表达水平,分析miR326和Ets-1 mRNA表达量与Th17细胞比例的相互关系,探讨miR326在SLE发病中可能的致病机制。<br>  方法:选取安徽医科大学附属省立医院风湿免疫科门诊及住院SLE患者40例,男5例,女35例,平均年龄36.00±12.58岁,均符合2009年美国风湿病学院(American College of Rheumatology。ACR)诊断标准,记录实验室指标(如白细胞、血小板、血沉、免疫球蛋白、补体、蛋白尿、抗核抗体、抗可溶性抗原抗体等)及临床表现。根据系统性红斑狼疮疾病活动指数(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)将狼疮患者划分为疾病活动组及稳定组,>4分的为活动组,≤4分的为稳定组,并将疾病活动组分为轻度活动组(4<SLEDAI≤9),中度活动组(9<SLEDAI≤14)和重度活动组(SLEDAI>14)。选取14名无自身免疫性疾病的健康志愿者为对照组,对照组与SLE组性别、年龄差异无统计学意义。采用流式细胞术检测Th17细胞(CD4+IL-17A+)/CD4+T细胞的比例,免疫磁珠法分选CD4+T细胞,采用实时定量荧光PCR检测CD4+T细胞中miR326及Ets-1 mRNA的相对表达量。定量资料两组间的比较使用t检验、秩和检验,组间比较使用Kruskal-Willis秩和检验、q检验、单因素方差分析。双变量符合正态分布的使用Pearson分析,余采用Spearman分析miR326、Ets-1 mRNA、Th17细胞比例之间以及三者与临床资料的相关性。<br>  结果:1) SLE患者组CD4+T细胞中miR326水平[2.821(0.704,6.983)]高于对照组[0.712(0.482,0.869)](Z=-2.981,P=0.003),活动组[4.994(2.515,14.717)]高于稳定组[0.906(0.376,2.793)](Z=-3.698,P=0.000),稳定组与对照组、轻中重活动组间差异无统计学意义;<br>  2) SLE患者Ets-1的表达水平[0.309(0.170,0.641)]低于对照组[0.723(0.460,0.987)](Z=-3.040,P=0.002),活动组[0.210(0.113,0.309)]低于稳定组[0.618(0.350,0.730)](Z=-3.426,P=0.001),稳定组与对照组、轻中重度活动组间差异无统计学意义;<br>  3) SLE患者Th17细胞比例(0.642±0.270%)较对照组(0.407±0.225%)增高(P=0.004),活动组(0.793±0.191%)高于稳定组(0.475±0.248%),稳定组与对照组、轻中重度活动组间差异无统计学意义;<br>  4) SLE患者miR326表达水平与Ets-1 mRNA表达水平呈负相关(r=-0.667。P<0.001),与Th17细胞比例呈正相关(r=0.525,P=0.001);Ets-1 mRNA表达水平与Th17细胞比例呈负相关(r=-0.465,P=0.003);<br>  5) SLE患者miR326的表达水平与SLEDAI评分呈正相关(r=0.531,P<0.001)。Ets-1与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.536,P<0.001),Th17细胞比例与SLEDAI评分呈正相关(r=0.514,P<0.001);<br>  6) SLE患者miR326水平及Th17细胞比例在皮疹、发热、血液系统及肾脏受累的患者增高(Z=-3.437,-2.484,-1.964,-2.431,P<0.05;Z=-3.162,-2.410,-3.630,-2.954,P<0.05),Ets-1 mRNA的表达量则降低(Z=-4.26,-3.280,-2.180,-2.389,P<0.05);<br>  7) miR326表达水平及Th17细胞比例与抗dsDNA(r=0.402,P=0.010;r=0.383。P=0.015)、抗核小体(r=0.463,P=0.003;r=0.475,P=0.002)呈正相关,与C3(r=-0.457,P=0.003;r=-0.559,P=0.001)、C4(r=-0.465,P=0.003;r=-0.389。P=0.013)负相关,Ets-1 mRNA表达水平与抗dsDNA、抗核小体负相关(r=-0.434,P=0.005;r=-0.550,P=0.001),与C3、C4正相关(r=0.424。P=0.006;r=0.456,P=0.003)。<br>  结论:系统性红斑狼疮患者CD4+T细胞中miR326表达水平明显增高并与Th17细胞比例、狼疮疾病活动指数呈正相关,与Ets-1 mRNA表达水平呈负相关,提示miR326可能通过抑制Ets-1基因转录,促进Th17细胞分化,参与SLE疾病活动。

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