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摘要目的：<br>　　研究重楼活性单体PP-26对肝癌HepG2细胞的增殖抑制效应及其机制，为重楼活性单体PP-26的临床抗肿瘤应用提供实验室数据支持。<br>　　方法：<br>　　1.噻唑蓝法（MTT法）检测不同浓度的重楼活性单体PP-26对人肝癌HepG2、胰腺癌SW1990、前列腺癌LNCaP及人正常肝L02细胞的增殖抑制作用，以及采用IC20浓度的PP-26联合不同浓度的氟尿嘧啶（5-FU）对肝癌HepG2细胞的药物敏感性检测；<br>　　2. Hoechst33258染色法检测重楼活性单体PP-26对肝癌HepG2细胞凋亡的形态学的改变；Annexin V-FITC/PI双染色法检测重楼活性单体PP-26对肝癌HepG2细胞凋亡的影响；<br>　　3.碘化丙锭（PI）单染流式细胞仪检测重楼活性单体PP-26对肝癌HepG2细胞周期的影响；<br>　　4.蛋白免疫印迹法（Western blotting法）检测重楼活性单体PP-26对肝癌HepG2细胞凋亡相关蛋白、Bcl-2家族蛋白和细胞周期相关蛋白表达水平的影响，以及对Akt信号通路相关蛋白表达水平的影响。<br>　　结果：<br>　　1. MTT法检测显示，重楼活性单体PP-26能显著抑制肝癌HepG2、胰腺癌SW1990及前列腺癌LNCaP细胞增殖，并呈剂量-效应关系，而对人正常肝L02细胞的毒性相对较小。不同浓度的PP-26作用于肝癌HepG2、胰腺癌SW1990及前列腺癌LNCaP细胞24 h的IC50分别为：6.94±0.72，2.53±0.14，4.20±0.37μmol/L；不同浓度的PP-26作用于人正常肝L02、肝癌HepG2、胰腺癌SW1990及前列腺癌LNCaP细胞48 h的IC50分别为：6.98±0.99，1.91±0.45，1.90±0.07，2.45±0.11μmol/L；不同浓度的PP-26作用于人正常肝L02、肝癌HepG2、胰腺癌SW1990及前列腺癌LNCaP细胞72 h的IC50分别为：4.22±0.23，1.54±0.06，1.57±0.09，2.01±0.07μmol/L，可见PP-26对人正常肝L02细胞的细胞毒作用低于癌细胞；以IC20浓度的PP-26联合不同浓度的5-FU显著增强对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用，提高HepG2细胞对5-FU的敏感性。<br>　　2. Hochest33258染色检测显示，3.2μmol/L及6.4μmol/L的重楼活性单体PP-26作用于HepG2细胞24 h后，荧光显微镜观察细胞核出现固缩、边聚、碎裂以及凋亡小体形成等凋亡的形态学改变；Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测结果显示。HepG2细胞总凋亡率随着PP-26浓度的增加而增加，呈剂量-效应关系。<br>　　3.碘化丙啶（PI）单染流式细胞术检测显示，随着作用于肝癌HepG2细胞的重楼活性单体PP-26浓度的增加，G2期细胞的比例逐渐增加，说明PP-26可以使肝癌HepG2细胞阻滞于G2期；同时Western blotting检测结果显示，细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin B1及细胞周期依赖蛋白激酶-4（CDK4）表达水平随着PP-26作用浓度的增加而下降，而Myt1、p21、p-cdc2（Tyr15）表达增高，说明细胞周期阻滞于G2期。<br>　　4. Western blotting结果显示，在肝癌HepG2细胞中，凋亡相关蛋白caspase9、caspase3、PARP随着PP-26浓度的增加表达下调，促凋亡蛋白Bax的表达上调，而抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1表达下调；同时，随着PP-26作用浓度的增加，磷酸化的Akt（p-Akt）的表达下调而总Akt表达变化不明显，Akt下游的GSK3β和Foxo3磷酸化水平也下降，说明重楼活性单体PP-26通过抑制Akt信号通路激活细胞线粒体凋亡途径而诱导HepG2细胞凋亡。<br>　　结论：<br>　　1.重楼活性单体PP-26可在体外显著抑制肝癌HepG2、胰腺癌SW1990、前列腺癌LNCaP细胞增殖，而对正常人肝LO2细胞的增殖抑制作用不明显，并能够提高肝癌HepG2细胞对氟尿嘧啶的敏感性。<br>　　2.重楼活性单体PP-26诱导肝癌HepG2细胞周期阻滞于G2期。<br>　　3.重楼活性单体PP-26可能通过抑制Akt信号通路，激活细胞线粒体凋亡途径而诱导肝癌HepG2细胞凋亡。