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摘要研究背景和目的：<br>　　肺癌是全球肿瘤死亡的首因。多学科综合治疗，如手术、化疗、放疗、靶向治疗等治疗的进步，其病死率仍位列所有癌症第一位，早期发现、早期诊断和早期治疗仍是防治的重要措施。然而，非小细胞肺癌术后5年生存率从IIIA期的19％到IA期的63%[1]，效果仍不能令人满意。因此，对于可手术切除的非小细胞肺癌患者，良好的预后因子或/和治疗靶点的发现和应用显得尤为重要。PACE4（Paired basic Amino acid cleaving enzyme4），是前蛋白转化酶（PCs）的一员，是一个参与了多种底物处理与激活的Ca2+依赖性丝氨酸蛋白酶家族[2]。该家族由九名成员组成：PC1/3、PC2、弗林蛋白酶、PC4、PC5/6、PACE4、PC7、SKI-1/S1P和PCSK9[3,4]。越来越多的证据表明，PCs参与了多种不同的癌症类型，其中包括PCs在人类肿瘤多阶段发展过程中获得的各生物功能中发挥的作用[5]。这些生物功能包括增殖信号传导、规避生长抑制因子、开启无限复制、诱导血管生成以及激活侵袭和转移[6-10]。各种肿瘤中均记录过PCs的过度表达，其中包括皮肤、卵巢、中枢神经系统、结肠和乳腺癌[11-14]。针对PACE4表达在不同肿瘤中的作用进行特异性调控，可能对肿瘤防治或改善患者预后有一定作用。本研究中，我们的目的在于：(I)使用免疫组化法检测172例NSCLC患者肿瘤样本中的PACE4表达；(II)评估PACE4表达与NSCLC临床病理参数之间的关系；(III)分析PACE4对NSCLC切除后患者生存率的影响。为进一步研究PACE4在肺癌中的作用机制打下基础。<br>　　材料和方法：<br>　　利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和免疫荧光技术（IF）检测非小细胞肺癌细胞株（A549、H460、H1975、H520、SPC-A-1、H1650）及人类支气管上皮细胞株（16HBE）中PACE4的表达水平。<br>　　收集2006年10月至2009年6月期间经广州医科大学附属第一医院确诊为非小细胞肺癌且存档的172例非小细胞肺癌和15例癌旁组织蜡块，制作成组织芯片，所有病例都均有完整的临床病理资料及5年以上的随访资料，术前均未接受放化疗。通过免疫组化EnVision二步法检测PACE4蛋白表达，应用Kaplan-Meier方法和Cox回归分析统计其蛋白表达水平与非小细胞肺癌预后的关系；同时利用χ2检验分析PACE4与非小细胞肺癌患者临床病理特征的关系。从而了解PACE4与非小细胞肺癌预后及肿瘤发展的关系。<br>　　结果：<br>　　应用qRT-PCR检测非小细胞肺癌细胞株（A549、H460、H1975、H520、SPC-A-1、H1650）及人类支气管上皮细胞株（16HBE）中PACE4的mRNA表达水平，结果显示：H1975、H520、SPC-A-1细胞株呈现高表达；而A549、H1650两个细胞株低表达。<br>　　应用IF检测非小细胞肺癌细胞株（A549、H1975、H520、SPC-A-1、H1650）及人类支气管上皮细胞株（16HBE）中PACE4的蛋白表达水平，结果显示PACE4在SPC-A-1细胞株中的表达最高，在H1975、H520、A549、H1650细胞中的表达逐渐降低。<br>　　PACE4在非小细胞肺癌组织中高表达，PACE4染色阳性的有111例，阳性率为64.5%（111/172），进一步分析显示PACE4表达水平与非小细胞肺癌患者的N分期及临床分期显著相关；172例非小细胞肺癌患者中5年生存率为34.7%，5年无病生存率为34.2%，PACE4阴性表达组5年生存率及5年无病生存率均高于PACE4阳性表达组；腺癌病例中，PACE4阴性表达组5年总生存率及5年无病生存率高于PACE4阳性表达组；早期病例中（I+II）PACE4阴性表达组5年总生存率及5年无病生存率高于PACE4阳性表达组；晚期病例中（III+IV） PACE4阴性表达组5年总生存率高于PACE4阳性表达组。COX多因素的回归分析表明PACE4是非小细胞肺癌独立预后因子。<br>　　结论：<br>　　1. PACE4在非小细胞肺癌中高表达，其表达水平与N分期及临床分期相关，提示PACE4可能是非小细胞肺癌一个新的转移相关蛋白。<br>　　2.单因素回归分析显示临床病理特征如N分期、临床分期及PACE4是非小细胞肺癌预后的影响因素。<br>　　3.多因素回归分析显示PACE4可能是非小细胞肺癌患者的不良预后因子。