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摘要目的：<br>　　本研究以食源性肥胖（diet-induced obesity，DIO）大鼠模型为研究载体，从单纯性肥胖（simple obesity）发病的关键环节-下丘脑Tsc1-mTOR信号通路入手，在前期本研究组证实DIO大鼠下丘脑结节性硬化症因子1(Tuberous sclerosis complex1，Tsc1)基因甲基化增加的基础上，观察下丘脑DNA甲基化转移酶(DNA Mthyl-Transferases，Dnmts)对Tsc1基因的甲基化修饰作用，调控下游哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex1，mTORC1)及关键因子在单纯性肥胖发病中的机制，从表观遗传学的角度观察针刺治疗肥胖的效应及机制。<br>　　方法：<br>　　选用刚断乳的健康清洁级，4周龄（体重70～90g）雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠，剔除体重不符合要求的大鼠，然后随机分为造模组和普通饲料组。造模组运用改良后的高脂饲料喂养诱导DIO大鼠模型，造模14周后，将造模成功的DIO大鼠随机分为肥胖组（即模型组）和针刺组；普通饲料组用普通饲料喂养14周，剔除体重不符合要求的大鼠后作为对照组。针刺治疗：选取“天枢、中脘、三阴交和后三里”穴，用自制大鼠固定器固定大鼠后进行电针治疗，选疏密波，2/15Hz，30min/天，5天/疗程，休息2天，共4个疗程，对照组和肥胖组同法固定但不针刺。针刺治疗结束后称量体重并予以禁食12h，于次日取动物标本，用免疫组化标记法检测大鼠下丘脑弓状核Dnmts（Dnmt2、Dnmt3a、Dnmt3b）的表达情况；用Western Blot蛋白质印迹法检测大鼠下丘脑弓状核mTORC1基因的蛋白表达情况；运用RT-PCR对大鼠下丘脑弓状核mTORC1及食欲肽（AgRP、NPY和PoMC）mRNA的含量及Tsc1基因甲基化进行检测，分别比较各组结果差异。<br>　　结果：<br>　　1、体重结果：针刺干预前，肥胖组和针刺组DIO大鼠体重明显高于对照组（P＜0.01），肥胖组和针刺组组间体重无统计学差异（P＞0.05）；针刺干预治疗后，肥胖组和针刺组体重、体脂及体脂率均明显降低（P＜0.01）。<br>　　2、下丘脑Tsc1甲基化结果：（1）Tsc1片段1甲基化：与对照组相比较，肥胖组大鼠Tsc1甲基化表达升高（P＜0.05）；电针干预治疗后，针刺组大鼠Tsc1甲基化表达降低，低于肥胖组（P＜0.05），针刺组大鼠Tsc1甲基化表达与空白组无差异（P＞0.05）。（2）Tsc1基因片段2甲基化：与对照组相比较，肥胖组大鼠Tsc1基因片段2甲基化表达升高（P＜0.05）；电针干预治疗后，针刺组大鼠Tsc1基因片段2甲基化表达降低，低于肥胖组，但无明显差异（P＞0.05），针刺组大鼠Tsc1基因片段2甲基化表达与空白组无差异（P＞0.05）。（3）Tsc1基因片段3甲基化：与对照组相比较，肥胖组大鼠Tsc1基因片段3甲基化表达显著性升高（P＜0.01）；电针干预治疗后，针刺组大鼠Tsc1基因片段3甲基化表达降低，低于肥胖组（P＜0.05），针刺组大鼠Tsc1基因片段3甲基化表达与空白组无差异（P＞0.05）。<br>　　3、下丘脑指标检测结果：（1）Dnmt2：与对照组相比较，肥胖组大鼠下丘脑Dnmt2平均光密度显著性升高（P＜0.01）；电针干预治疗后，针刺组大鼠下丘脑Dnmt2平均光密度明显降低，低于肥胖组（P＜0.01），针刺组大鼠下丘脑Dnmt2平均光密度与对照组无差异（P＞0.05）。（2）Dnmt3a：与对照组相比较，肥胖组大鼠下丘脑Dnmt3a平均光密度显著性升高（P＜0.01）；电针干预治疗后，针刺组大鼠下丘脑Dnmt3a平均光密度降低，低于肥胖组（P＜0.05），针刺组大鼠下丘脑Dnmt3a平均光密度与对照组无差异（P＞0.05）。（3）Dnmt3b：与对照组相比较，肥胖组大鼠下丘脑Dnmt3b平均光密度显著性升高（P＜0.01）；电针干预治疗后，针刺组大鼠下丘脑Dnmt3b平均光密度明显降低，低于肥胖组（P＜0.01），针刺组大鼠下丘脑Dnmt3b平均光密度与对照组无差异（P＞0.05）。（4）mTORC1mRNA和蛋白：与对照组相比较，肥胖组大鼠下丘脑mTORC1基因mRNA、蛋白显著性升高（P＜0.01）；电针干预治疗后，针刺组大鼠下丘脑mTORC1基因mRNA、蛋白明显降低，低于肥胖组（P=0.01，P＜0.05），针刺组大鼠下丘脑mTORC1基因mRNA、蛋白高于对照组（P＜0.05，P＜0.01）。（5）AgRP mRNA：与对照组相比较，肥胖组大鼠下丘脑AgRP基因mRNA显著性升高（P＜0.01）；电针干预治疗后，针刺组大鼠下丘脑AgRP基因mRNA明显降低，低于肥胖组（P＜0.01），针刺组大鼠下丘脑AgRP基因mRNA高于对照组，但无统计学差异（P＞0.05）。（6）NPY mRNA：与对照组相比较，肥胖组大鼠下丘脑NPY基因mRNA显著性升高（P＜0.01）；电针干预治疗后，针刺组大鼠下丘脑NPY基因mRNA明显降低，低于肥胖组（P＜0.01），针刺组大鼠下丘脑NPY基因mRNA高于对照组（P＜0.01）。（7）PoMC mRNA：与对照组相比较，肥胖组大鼠下丘脑PoMC基因mRNA显著性降低（P＜0.01）；针刺组大鼠下丘脑PoMC基因mRNA明显降低，高于肥胖组（P＜0.05），电针干预治疗后，针刺组大鼠下丘脑PoMC基因mRNA低于对照组（P＜0.05）。<br>　　结论：<br>　　1、针刺“中脘”、“天枢”、“三阴交”、“后三里”能有效减轻DIO大鼠体重，降低体脂含量及体脂率；<br>　　2、DIO大鼠下丘脑DNA甲基化转移酶（Dnmt2、Dnmt3a、Dnmt3b）活性增加，Tsc1基因启动子甲基化增加；针刺治疗单纯性肥胖，可能通过负调控DNA甲基化酶转移酶的活性，使Tsc1去甲基化，抑制mTORC1活性，从而调控食欲调节因子NPY、AgRP及PoMC等改善肥胖。