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摘要阿尔兹海默症（Alzheimer’s disease, AD）是一种以β淀粉样蛋白（β-amyloid， Aβ）级联假说为主要病因的老年神经退行性疾病。蜂王浆对神经细胞具有营养和促进细胞分化的作用。主要王浆蛋白1（MRJP1）是主要王浆蛋白家族中含量最高的成员，《Nature》报道指出MRJP1是蜜蜂幼虫发育成为蜂王的关键因子。主要王浆蛋白酶解后的蜂王浆多肽(Royal Jelly Peptides，RJP)具有极强的抗氧化和抗衰老的能力。本论文以主要王浆蛋白的主要成分MRJP1为研究目标，探索了主要王浆蛋白1（MRJP1）的分离纯化方法，而且首次使用胰蛋白酶酶解主要王浆蛋白1（MRJP1），并以AD的两种经典细胞模型为筛选活性多肽的依据，对具有活性的蜂王浆多肽进行质谱鉴定。结果如下：<br>　　首先，本论文以新鲜的蜂王浆为原材料，按一定的比例将蜂王浆与磷酸盐缓冲液混合，抽提水溶性蜂王浆蛋白，利用Ni柱亲和层析、阴离子交换层析等蛋白纯化技术从天然的蜂王浆中分离纯化得到MRJP1样品，经过串联质谱技术鉴定该样品为MRJP1。<br>　　其次，分离纯化得到的MRJP1与胰蛋白酶按质量比2:1的比例进行酶解反应，所得酶解产物，经过超滤管超滤，以及反相高压液相色谱分离制备蜂王浆多肽样品。<br>　　再次，以AD的两种经典细胞模型人神经瘤母细胞SH-SY5Y及小鼠神经瘤母细胞 N2a/APP695sw作为筛选活性多肽的依据。经过对多肽样品进行SH-SY5Y细胞的MTT细胞毒性试验以及N2a/APP695sw细胞的AβELISA检测，发现分子量0-3 kDa的RJP和RP-HPLC得到的C组RJP对细胞具有显著地保护作用，而且浓度为114.6μg/ml的分子量0-3 kDa的RJP和浓度为11.1μg/ml的C组RJP对细胞具有较高的药理活性。<br>　　最后，采用高性能液质联用质谱技术对具有显著药理活性的C组RJP进行多肽组成及寡肽的氨基酸序列分析。质谱结果显示，其多肽组成较复杂。使用mascot软件检索ncbi_insecta数据库，匹配到三条寡肽，并得到其氨基酸序列及分子量信息。<br>　　本研究首次以在蜂王幼虫的发育过程中起关键作用的MRJP1为研究目标，探索其胰蛋白酶酶解产物蜂王浆多肽对AD的药用价值。通过对AD的两种细胞模型的保护作用研究显示，具有药理活性的RJP来源于MRJP1。利用高性能液质联用质谱技术对具有药理活性的RJP进行结构的初步分析，为研制具有预防和治疗AD功能的天然药物提供物质基础和理论依据。