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机械压力敏感性通道蛋白表达水平与COPD患者气道重塑的关联性分析

摘要目的:探讨机械压力敏感性瞬时受体电位C1蛋白(TRPC1)在慢性阻塞性肺病患者(COPD)支气管上皮细胞的表达情况,阐述TRRC1蛋白参与COPD气道重塑的分子机制。<br>  方法:选择预行纤维支气管镜检查的患者64例作为非手术组,根据COPD诊治指南分为轻至中度COPD患者(COPD组)40例和无气道慢性炎症性疾病患者(对照组)24例。分别检测第1秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV1/FVC)和实测值占预测值百分比(FEV1%pred);在纤维支气管镜引导下得到肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法测定BALF中TRPC1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平。分析BALF中TRPC1表达量与FEV1%pred、FEV1/FVC水平、MMP-9及TGF-β1表达水平的相关性。选取行肺叶切除术患者的肺组织标本17例作为手术组,其中COPD组8例及对照组(无慢性气道炎症性疾病)9例。高分辨 CT下测量同一部位支气管重塑指标,测定壁厚与外径比率(TDR%)、气道壁面积占总横截面积比(WA%)对比气道结构变化。免疫组织化学法明确TRPC1蛋白在人支气管上皮层的分布特点,用Imagepro-plus6.0软件比较COPD组与对照组气道上皮细胞中TRPC1蛋白的表达差异,Western blotting法测定TRPC1表达水平。分析气道支气管上皮细胞中TRPC1表达水平与TDR%、WA%的相关性。<br>  结果:非手术组患者肺功能,与对照组比较,COPD组患者FEV1%pred和FEV1/FVC均下降(P<0.05),TRPC1、MMP-9和TGF-β1表达水平升高(P<0.05)。偏相关分析,COPD组TRPC1表达水平与FEV1%pred(r=-0.34,P=0.002)和FEV1/FVC(r=-0.38,P=0.004)呈负相关关系,与MMP-9(r=0.36,P=0.004)和TGF-β1(r=0.61,P=0.002)表达量呈正相关。手术组组织标本中TRPC1蛋白主要分布于支气管上皮细胞腔内侧,表达于柱状细胞或杯状细胞胞浆内;其中COPD组累积光密度(IOD)/面积(area)比值高于对照组(P<0.05);Western boltting法检测,COPD组支气管黏膜上皮内TRPC1蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。偏相关分析,COPD组TRPC1表达水平与TDR%(r=0.59,P=0.002)和WA%(r=0.60,P=0.002)呈正相关关系。<br>  结论:COPD患者支气管粘膜上皮细胞中TRPC1呈高水平表达,并与肺功能受损程度、气道重塑相关因子表达水平呈正相关关系,说明感知压力的TRPC1通道可促进COPD的发生发展。

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