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摘要目的:以全反式维甲酸（All-trans Retinoic Acid, ATRA)诱导构建的神经管畸形鼠模型为研究对象，探索在神经管畸形(Neural Tube Defects, NTDs)的发生发展过程中H3K27me3（H3组蛋白第27位赖氨酸的三甲基化状态）和其下游叶酸代谢相关基因Adcy2的表达变化情况，了解叶酸干预在这一过程中的影响作用，探讨在神经管畸形的发生过程中叶酸干预的预防作用，为防治神经管畸形(Neural Tube Defects, NTDs)的早期发生提供可靠的理论依据。<br>　　方法:1.动物模型的建立：把24只健康且性成熟的雌性SD大鼠分为随机三组；1.1.胎鼠大体形态学观察：于E15d时剖宫取胎，观察胎鼠的形态学特征，记录各个类型胎鼠数量，统计并分析畸形胎鼠发生率。1.2.胎鼠神经管电镜下观察：剥离出各组胎鼠神经管，经过电镜包埋后置于透射电子显微镜下观察并拍照。1.3.病理学观察：取各组胎鼠组织进行HE染色，并在显微镜下观察其病理学变化。<br>　　2.各组胎鼠神经管中H3K27me3表达量的检测：采用免疫组织化学染色法和Western blot技术检测三组胎鼠中的H3K27me3的表达，并对其进行定性、定量分析。<br>　　3.各组胎鼠神经管中基因 Acdy2表达量的测定：采用QRT-PCR技术对各组胎鼠中Adcy2基因的表达量进行测定分析。<br>　　结果:1.动物模型制作及观察结果：1.1.统计结果分析显示正常组未发现畸形胎鼠，实验组的神经管畸形发生率为84％，叶酸干预组的畸形发生率为41.1%；实验组畸形发生率和正常组比较明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.01），叶酸干预组比正常组畸形率增加，但与实验组比较其畸形率显著下降，差异具有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　1.2.各组神经管电镜下观察结果：正常组神经管组织，其细胞核完整，呈圆形或卵圆形。线粒体清晰可见；实验组神经管组织细胞核不完整，变形严重，线粒体出现皱缩，甚至溶解；叶酸干预组神经管细胞核虽然也存在变形、皱缩现象，但与实验组比较，其状况有相应的改善，细胞间隙趋于正常，少部分线粒体出现皱缩、溶解。<br>　　1.3.HE染色结果：正常组胎鼠可看到其神经管发育正常，脊髓形态正常。实验组中显性脊柱裂的胎鼠，其脊髓改变复杂，脊柱背侧覆皮中断不连续，脊髓结构破坏紊乱，脊髓伴随脊膜向外膨出，多伴有炎性细胞侵袭。叶酸干预组中脊柱裂较少，无尾畸形较多，相比实验组而言叶酸干预组发育有所改善，但比正常组发育仍然较差。<br>　　2.各组神经管中H3K27me3表达量的检测：免疫组化结果显示：正常组中H3K27me3的表达量低，实验组中为强阳性表达，叶酸干预组中其表达量稍低于实验组，但并没有显示出差异性，而与正常组相比较，差异较明显，具有统计学意义（P＜0.05）。Western blot检测结果显示：实验组中H3K27me3的表达量高于正常组和叶酸干预组，差异有统计学意义（P＜0.05），叶酸干预组表达量介于两组之间，差异明显，具有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　3.各组神经管中Adcy2基因的QRT-PCR检测结果显示：在实验组中高表达，与正常组和叶酸干预组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）；在叶酸干预组中的表达量介于两组之间，差异具有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　结论:1.叶酸干预，可以有效降低神经管畸形率的发生；<br>　　2.神经管畸形胎鼠中，H3K27me3表达水平上调，叶酸代谢相关基因Adcy2的表达上调，叶酸干预可以有效降低两者的表达量。