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自分泌移动因子(AMF/PGI)促进子宫内膜癌发生发展的机制研究

摘要子宫内膜癌是最常见的三大妇科恶性肿瘤之一。据 FIGO统计美国2015年全年发病人数54870,死亡人数10170,在我国2015年统计数据分析年发病人数为63400,均较2014年呈上升趋势。近几年关于子宫内膜癌发生发展的机制方面有了突破性进展,有证据提示内膜癌的发生与持续高雌状态有关,但对其转移和侵袭的最终发病机理不清,而对早期诊断缺少特异性的检测手段,对于晚期病例的治疗仍处于棘手状态,以及对子宫内膜癌的靶向治疗仍缺少突破性研究,寻找子宫内膜癌特异性标记物对子宫内膜癌的靶向治疗具有重要意义<br>  自分泌移动因子(Autocrine Motility Factor,AMF)又称葡萄糖异构酶(PGI),由肿瘤细胞自身分泌的并通过自分泌途径作用于肿瘤细胞的一种细胞因子。已有研究中发现 AMF/PGI在多种肿瘤里能促进肿瘤分化转移和局部直接侵蚀且与临床预后相关,由此设想 AMF/PGI可能为肿瘤转移治疗的潜在靶点。AMF/PGI在子宫内膜组织中的表达还未探索,是否促进子宫内膜癌的发生发展未见相关报道,因此探索AMF/PGI在子宫内膜癌中的作用具有良好的研究和开发前景。<br>  本课题中我们探讨了 AMF/PGI在子宫内膜组织及血清中的表达,通过体外试验分析论证,子宫内膜细胞株Ishikawa和HEC--1B具有分泌AMF/PGI的能力,AMF/PGI通过 MAPK--ERK信号通路促进子宫内膜癌细胞迁移、侵袭和增值的能力。我们通过裸鼠荷瘤模型与荧光显微镜活体成像技术,进一步验证体外试验结果。这一研究为子宫内膜癌进展恶化阐明了新的机制,同时为靶向 AMF/PGI治疗转移性子宫内膜癌提供试验依据。<br>  本课题共分三个部分:①通过IHC、RT--PCR和ELISA的方法检测AMF/PGI及其受体AMFR在子宫内膜组织中的表达和外周血清中AMF/PGI的含量,探讨AMF/PGI与子宫内膜癌的关系;②通过 Transwell细胞迁移侵袭试验,MTS细胞增殖试验,3D培养克隆形成试验,蛋白磷酸化抗体芯片等方法,检测AMF/PGI对子宫内膜癌细胞 Ishikawa和 HEC--1B迁移、侵袭和增殖的影响并探讨其中的具体作用机制;③通过裸鼠腹腔和左心室两种子宫内膜癌细胞接种模型,利用活体动物成像技术及生化方法探究体内环境下AMF/PGI对调控子宫内膜癌细胞的调控,进一步证实AMF/PGI参与子宫内膜癌的播散和转移。

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