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白芨胶、明胶海绵、MPH在肾穿刺通道中止血作用及IL-10、TNF-α表达的对比研究

摘要目的:<br>  建立新西兰实验兔肾脏穿刺造瘘模型;白芨胶(Bletilla glue)、明胶海绵、微孔多聚糖止血粉(Microporous polysaccharide hemispheres,MPH)三种止血材料应用于肾脏穿刺通道,记录术中穿刺通道止血时间、术后尿液中晶体含量、穿刺通道中TNF-α、IL-10表达及其相关性变化。比较三种材料在肾穿刺通道中的止血时间、术后尿液结晶含量以及肾脏穿刺通道愈合时间。以寻找一种较为合适的无管化经皮肾镜术(Tubeless Percutaneous Nephrolithotomy,TPCNL)肾穿刺通道止血栓塞剂,利于减少出血及尿外渗等无管化经皮肾镜术并发症的发生。<br>  方法:<br>  选用新西兰实验兔126只(雌雄不限,体重2.0-2.5kg),随机分成三组,即白芨胶组、明胶海绵组、微孔多聚糖(MPH)组,每组42只;将三组实验兔均建立单侧肾穿刺造瘘模型,并于肾脏穿刺通道内分别注入白芨多糖胶、明胶海绵、微孔多聚糖止血粉,术中观察并记录各组实验兔术中穿刺止血时间。三组分别于术后3d、1w、2w、3w、4w、6w和8w七个时间点处死。膀胱穿刺取尿液行尿沉渣中晶体数量定量检查,对比各组实验兔尿液中晶体含量。取肾脏穿刺通道组织行HE染色,观察通道处肾脏组织不同时间点的病理改变;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测各组肾穿刺通道中TNF-α、IL-10两种蛋白不同时间点的变化。<br>  结果:<br>  1.三组实验兔术中肾穿刺通道止血时间为明胶海绵组(82.40±18.40 S)<白芨胶组(92.69±22.63S)<MPH组(120.33±26.23S),两两比较差异有统计学意义(P<0.05),三组间方差分析结果显示差异具有统计学意义(F=31.504,P<0.001)。<br>  2.HE观察结果各组肾穿刺通道病理变化。白芨胶组:3d时处死动物,观察肾穿刺通道见大量肉芽组织及新生血管形成,伴炎性细胞浸润。2周后见少量瘢痕组织形成,3周时肾脏穿刺通道已愈合。明胶海绵组:建模3天后观察通道内可见大量炎性细胞浸润,无明显肉芽组织以及新生血管形成,通道内可见陈旧性红细胞;建模后3周通道内可见较多成熟的血管腔,伴有少量瘢痕组织增生以及炎性细胞浸润,表明仍处于通道修复中;约于建模后6周时通道已基本愈合。MPH组:建模3天后观察通道内可见大量炎性细胞浸润,无明显肉芽组织以及新生血管形成,通道内可见陈旧性红细胞;建模后3周通道内可见较多成熟的血管腔,伴有少量瘢痕组织增生以及炎性细胞浸润,表明仍处于通道修复中;约于建模后6周时通道已基本愈合。上述结果显示,三组实验模型建模3天时通道中白芨胶组炎症反应最轻,瘢痕愈合最早。<br>  3.三组实验兔各时间点尿液晶体数比较显示:与明胶海绵及MPH相比,白芨胶组3d和1w时尿液晶体数与其余两组差异无统计学意义(P>0.05);但在2w、3w、4w、6w、8w时白芨胶组晶体数显著低(P<0.05)。<br>  4.免疫组化结果显示,IL-10及TNF-α的表达主要在肾小管及肾小球胞浆中,显微镜下观察阳性染色呈棕黄色颗粒。且各组积分光密度(IOD)结果显示,3d、1w、2w、3w、4w、6w、8w白芨胶组IL-10表达显著高于其余两组(P<0.05),而TNF-α的表达显著低于其余两组(P<0.05)。<br>  结论:<br>  1.三种止血材料在术中止血时间依次为明胶海绵组<白芨胶<MPH。<br>  2.与明胶海绵及MPH相比,白芨胶在肾组织中较快吸收,术后晶体产生较少,术后形成结石风险小于后两种材料。<br>  3.白芨胶用于肾穿刺通道止血所产生的IL-10高于明胶海绵及MPH,TNF-α低于明胶海绵及MPH,更利于穿刺通道组织的愈合。

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导师 李道兵
分类号 R699.2R973.1
发布时间 2018-01-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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