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摘要研究背景:<br>　　甲基丙二酸血症（methylmalonicacidemia，MMA）又被称为甲基丙二酸尿症（methylmalonicaciduria），是氨基酸与有机酸代谢异常疾病中最常见的一种，是支链氨基酸代谢途径异常，属于常染色体隐性遗传性有机酸血症性疾病。MMA主要由于甲基丙二酰辅酶A（methylmalonyl coenzyme A,MMCoA）变位酶（methylmalonyl-CoA mutase,MCM）缺陷及其辅酶-5’脱氧腺苷钴胺素（维生素B12）（Ado-Cbl）合成代谢障碍，导致甲基丙二酸、丙酸和甲基枸橼酸等异常蓄积，造成多个脏器功能受到损伤，尤其是神经系统的损伤。Ado-Cbl代谢异常包括cblA、cblB、cblC、cblD、cblE、cblF、cblG、cblH8个亚型，其中cblC最常见。<br>　　cblC病患者可以显示出广泛的临床表现，跨越了产前阶段到成年后期。而同型半胱氨酸浓度增加和甲基代谢障碍可能有助于疾病相关的并发症，黄斑和视网膜变性的特点，并且每个不同个体发病时的临床表现各不相同：嗜睡、反复呕吐、喂养困难、肌张力低下、低体温、呼吸窘迫，惊厥反复发作或惊厥持续状态、严重的酮症酸中毒，高氨血症，高乳酸血症，肝功能损失、肾脏损失，眼科异常、皮肤异常、巨幼红细胞性贫血、中性粒细胞减少和血小板减少，脑水肿、脑出血，严重时可导致死亡。<br>　　cblC病的致病基因为MMACHC基因，该基因位于1号染色p34编码区域，编码cblC蛋白，功能是在细胞胞浆内催化还原脱氰反应和合成腺苷钴胺素反应。当其发生基因突变时，编码cblC的蛋白不能够发挥其正常的生理功能，从而导致疾病发生。<br>　　本文中3例甲基丙二酸血症根据其典型的临床症状、生化特征进行总结，对疾病能够早期发现，早期明确诊断，并进行有效的治疗，改善患者预后提供帮助。同时，积极对其先证者及父母进行基因检测，了解先证者疾病发生的遗传方式（自身基因突变或遗传自父母），并对其提供相应的遗传咨询信息，在新生儿疾病筛查的早期检测，并仔细评估cblC病治疗方法，为该类疾病患者提供新的改善预后的机会，产前进行诊断可减少该类遗传性疾病的发生，补充相关基因的突变信息，完善MMACHC基因突变类型。<br>　　目的:<br>　　1．总结来自3个家系，共3例MMA患者的临床症状、生化特征、治疗效果；<br>　　2．研究MMA患者发病的分子遗传学方式，明确诊断，了解MMACHC基因突变所发生的情况，推断其相关性，为患者提供遗传咨询及产前诊断。<br>　　方法:<br>　　1．收集来自3个家系，共3例MMA患者的住院情况包括临床症状、生化特征、治疗效果；<br>　　2．样本采集：在研究对象签署送检同意书的情况下，采集研究对象及父母、50例正常健康体检患者晨起空腹的外周静脉血液各5ml；<br>　　3．基因组 DNA的提取：使用基因组 DNA提取试剂盒提取提取血液样中的基因组DNA；<br>　　4．引物设计：根据人类基因组数据库中设计MMACHC基因序列的引物，采用聚合酶链反应（PCR，Polymerase Chain Reaction）法扩增目的基因，<br>　　5．产物回收：采用PCR产物回收试剂盒进行产物回收；<br>　　6．上机测序：对 PCR产物直接进行 DNA测序，在人类基因组数据库GenBank中原始的基因序列进行对比并分析，获得基因突变位点。<br>　　结果:<br>　　1．PCR扩增产物与预计扩增片段长度大致一致，无非特异性扩增片段，可进型步进行纯化和测序；<br>　　2．家系1中先证者MMACHC基因发现复合杂合核苷酸变异：第3外显子c.394C>T的杂合无义突变，第4外显子c.656_658del核苷酸序列缺失的杂合突变。父亲第3外显子c.394C>T杂合无义突变；母亲第4外显子c.656_658del核苷酸序列缺失的杂合突变；<br>　　3．家系2中先证者MMACHC基因发现：第4外显子 c.609G>A的纯合无义变异。受检者其父母均为第4外显子 c.609G>A杂合无义突变；<br>　　4．家系3中先证者MMACHC基因发现复合杂合核苷酸变异：第1外显子c.80A>G的杂合错义突变，第4外显子c.609G>A的杂合无义突变。父亲第1外显子c.80A>G杂合错义突变；母亲第4外显子c.609G>A杂合无义突变。<br>　　结论:<br>　　1．收集的3个家系中先证者均符合MMACHC的临床及生化特征，诊断明确，早期临床干预治疗，预后均有明显改善；<br>　　2．家系1中先证者的分子遗传学基础是c.394C>T和c.656_658del复合杂合突变的组合，经查询基因库，c.656_658del变异的致病性尚未见文献报道，高度怀疑是1个新的遗传突变。父母再次妊娠时可以行遗传咨询并对胎儿进行基因测序来根据结果做出产前诊断；<br>　　3．家系2和家系3中先证者的分子遗传学基础c.609G>A纯合突变、c.80A>G及c.609G>A复合杂合突变的基因突变位点均已报道过，存在致病性，与既往报道一致。