摘要目的:<br> 研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)对子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa增殖的影响,并探讨雌激素受体α(ERα)和Ack1激酶在其调控机制中的作用。<br> 方法:<br> (1)无雌激素环境下,EGF和酪氨酸激酶抑制剂Dasatinib(达沙替尼)分别作用于子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa后,应用CCK-8法检测子宫内膜腺癌细胞的增殖情况;应用统计学软件SPSS19.0进行数据分析。<br> (2)无雌激素环境下,EGF和酪氨酸激酶抑制剂Dasatinib(达沙替尼)分别作用于子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa后,应用Western blot法检测Ishikawa细胞ERα及Ack1激酶非磷酸化与磷酸化状态蛋白的表达情况;应用Image J图像分析软件,通过磷酸化目的蛋白与非磷酸化目的蛋白条带的吸光度值比值进行目的蛋白的相对含量分析。<br> 结果:<br> (1)在无雌激素条件下,EGF(10μg/L)能够促进子宫内膜腺癌Ishikawa细胞增殖。与对照组比较有显著性差异,P<0.05。<br> (2)达沙替尼(10 nmol/L-800 nmol/L)呈剂量依赖性抑制EGF诱导的子宫内膜腺癌Ishikawa细胞增殖。与EGF处理组比较有显著性差异,P<0.05。<br> (3)EGF能够诱导Ishikawa细胞Ack1激酶及ERαTyr-537特异位点磷酸化。与对照组相比,Ack1激酶和ERαTyr-537位点的磷酸化水平升高,结果有显著性差异,P<0.05。<br> (4)达沙替尼能够抑制Ishikawa细胞EGF诱导的Ack1激酶及ERαTyr-537磷酸化。当达沙替尼浓度大于400 nmol/L时,Ack1激酶及ERαTyr-537位点磷酸化被完全抑制,与对照组比较有显著性差异,P<0.05。<br> 结论:<br> (1)EGF促进子宫内膜腺癌Ishikawa细胞Ack1激酶及ERαTyr-537磷酸化及促进Ishikawa细胞增殖(P<0.05),EGF在子宫内膜癌细胞发生发展作用明显,为寻找新型抗肿瘤药物治疗靶点提供了理论基础。<br> (2)达沙替尼能够抑制子宫内膜腺癌Ishikawa细胞EGF诱导的Ack1激酶及ERαTyr-537磷酸化,并抑制Ishikawa细胞增殖(P<0.05),达沙替尼可应用于子宫内膜癌的治疗。
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