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摘要双功能药物的疗效在癌症、糖尿病、抑郁症以及感染性疾病的治疗中已被验证，近年来镇痛类的双功能分子在高效、低副作用的镇痛新药研发中也受到广泛关注。最近，本实验室设计并合成了一类阿片/神经肽FF（NPFF）受体的双功能分子用于镇痛新药研究，其中新型肽类分子 BN-9（Tyr-D.Ala-Gly-Phe-Gln-Pro-Gln-Arg-Phe-NH2）能同时激活阿片和 NPFF受体，并在急性痛模型中能介导高效、无耐受的镇痛作用。为了进一步验证双功能激动剂BN-9的无耐受镇痛作用，本论文在临床前病理痛模型中全面地评价了其镇痛作用位点、镇痛药效和耐受现象。<br>　　首先，本论文选用经典的角叉菜胶炎症痛模型，结合阿片和 NPFF受体的拮抗剂，通过不同给药途径来探讨 BN-9的镇痛作用位点。研究结果表明小鼠脊髓及脊髓以上水平注射 BN-9可通过激活阿片受体而剂量依赖地减缓角叉菜胶炎症痛诱导的机械性异常疼痛，并且该中枢镇痛作用能被NPFF受体拮抗剂RF9增强。相比之下，足跖部、腹腔、皮下和肌肉注射 BN-9的抗异常性疼痛作用主要依赖于阿片受体，与 NPFF受体无关。此外，侧脑室注射阿片受体拮抗剂甲碘化纳洛酮不能拮抗 BN-9（i.p.）的镇痛而腹腔注射拮抗剂时可以拮抗，表明腹腔注射 BN-9主要在外周产生镇痛。同时，脚掌注射纳洛酮能够显著阻断腹腔注射 BN-9的镇痛，进一步证明 BN-9的外周镇痛特性，而 NPFF受体不参与 BN-9的外周镇痛。上述研究结果表明在角叉菜胶炎症痛中各个水平（中枢、外周和系统）注射 BN-9都能够剂量依赖地缓解机械性痛觉敏感，侧脑室水平的镇痛作用最强，脊髓水平的镇痛作用次之。其中，中枢注射 BN-9表现为阿片和 NPFF受体的激动活性。而外周和系统注射 BN-9主要通过激活外周阿片受体发挥镇痛，并且 BN-9不能通过血脑屏障。<br>　　鉴于 BN-9无法透过血脑屏障且中枢镇痛较强，因此选用临床上可以实现的脊髓注射来研究 BN-9在其他临床前实验动物模型的镇痛作用机制以及耐受现象。结果表明 BN-9在 CFA炎症痛模型、手术后痛模型、醋酸扭体和福尔马林痛中均能够产生剂量依赖的镇痛作用，但是在每个模型中的作用机制各不相同。在 CFA炎症痛中，阿片受体拮抗剂可以拮抗 BN-9的抗伤害感受作用而RF9可以加强其镇痛，进一步证明 BN-9的阿片与 NPFF受体的双功能激动特性。手术后痛模型中纳洛酮和 RF9均能够拮抗 BN-9的镇痛。醋酸扭体与福尔马林痛中 BN-9的镇痛主要由阿片受体介导，与 NPFF受体无关。另外，BN-9在正常大鼠中的耐受研究表明正常大鼠中连续七天鞘内注射 BN-9（1 nmol）对大鼠基础痛阈值（机械刺激）没有影响，而吗啡（2 nmol）引起了明显的痛觉敏感。CFA炎症痛大鼠中连续注射 BN-9（1 nmol）表现出强效的抗痛敏（光热刺激）活性，且与吗啡（2 nmol）没有交叉耐受。总之，BN-9对急性痛和慢性痛都有明显调节作用，且主要通过阿片受体介导镇痛。在慢性痛模型中BN-9可以产生有效的无耐受形成的抗伤害感受作用。