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摘要【目的】<br>　　CPSF6参与许多细胞生理过程和肿瘤的发生发展；我们前期研究发现其为肝癌组织的高表达基因，但CPSF6对肝癌细胞的生物学行为影响尚未清楚。本课题主要是明确CPSF6在肝癌细胞和正常肝细胞中的表达，转染靶向CPSF6 siRNA进肝癌细胞中，改变CPSF6表达，然后检测肝癌细胞的生物学行为。<br>　　【方法】<br>　　1.实时荧光定量PCR检测CPSF6基因在MHCC97H、Huh7、SMMC7721、LM3肝癌细胞株及HL7702正常肝细胞株中的表达。<br>　　2.应用siRNA设计软件初筛3对siRNA，通过脂质体转染肝癌Huh-7、MHCC97H细胞后，运用实时荧光定量PCR检测CPSF6基因的表达。<br>　　3.把两组肝癌细胞分为三个实验组，即空白对照组（cell组），阴性对照组（Negative control，即NC组），siRNA组。<br>　　4.实时荧光定量PCR和Western Blot检测两株肝癌细胞各实验组CPSF6 mRNA和蛋白的表达。<br>　　5.采用 CCK8试剂盒检测细胞增殖率，采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡，采用划痕实验检测细胞迁移能力。<br>　　【结果】<br>　　1. CPSF6在4株肝癌细胞系中表达高于在正常肝细胞的表达，其中在Huh-7和MHCC97H肝癌细胞中表达量最高。<br>　　2.设计的3对CPSF6-siRNA-278、CPSF6-siRNA-498、CPSF6-siRNA-905对两株肝癌细胞Huh-7和MHCC97H表现出不同的干扰效果，其中CPSF6-siRNA-498在使用量为50nM时对Huh-7 CPSF6基因的干扰效率最高，为82.43%；CPSF6-siRNA-905在使用量为50nM时对MHCC97H CPSF6基因的干扰效率最高，为61.89%。<br>　　3.两株肝癌细胞Huh-7和MHCC97H中，siRNA组与cell组及NC组比较， CPSF6 mRNA和蛋白表达量明显降低，P＜0.01。<br>　　4.在Huh-7和MHCC97H肝癌细胞中，与cell组和NC组比较，siRNA组24h增值率没统计学意义（P＞0.05），而48h、72 h细胞增殖率明显减低（P＜0.01）。<br>　　5.肝癌细胞Huh-7中siRNA-498组与cell组和NC组比较，在G1期细胞比例显著增高，P＜0.01，在G2期无统计学意义，P＞0.05，在S期显著减少，P＜0.01；肝癌细胞MHCC97H中siRNA-905组与cell组和NC组比较，G1期细胞比例增高, P＜0.01,在G2期比例减少，P＜0.01，在S期比例减少，P＜0.05。<br>　　6.肝癌细胞Huh-7和MHCC97H中siRNA组与cell组及NC组比较，细胞总凋亡率显著增高,P＜0.01。<br>　　7.肝癌细胞Huh-7和MHCC97H中siRNA组与cell组及NC组比较，6h、24h细胞愈合率无统计学意义， P>005；48h细胞愈合率显著低于cell组及NC组， P＜0.01。<br>　　【结论】<br>　　1. CPSF6在4株肝癌细胞中表达高于正常肝细胞的表达，且每株肝癌细胞CPSF6的表达量不相同。<br>　　2. CPSF6-siRNA-498在Huh-7细胞中能明显抑制CPSF6的表达, CPSF6-siRNA-905在MHCC97H细胞中能明显抑制CPSF6的表达.<br>　　3.在两株肝癌细胞Huh-7和MHCC97H中，CPSF6能促进细胞分裂增殖和转移，抑制细胞凋亡，从而促进肝细胞癌的生长。