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摘要目的：<br>　　以小鼠巨噬细胞RAW264.7为研究对象，分析RAW264.7细胞的Rac1表达水平，通过构建Rac1载体和特异性siRNA探讨其对RAW264.7细胞生物学活性的影响，为进一步探讨Rac1的免疫调节作用奠定良好的基础。<br>　　方法：<br>　　（1）经反转录法克隆Rac1的cDNA并构建Rac1基因表达载体pCDNA3.1-Rac1，酶切鉴定并进行序列测定验证。<br>　　（2）用脂质体将重组质粒pCDNA3.1-Rac1和siRNA转入RAW264.7，Western blot技术检测Rac1的蛋白表达水平，实时荧光定量PCR（qRT-PCR）测定Rac1 mRNA以及IL-1β、IL-6、IL-33和TNF-α的 mRNA表达水平。<br>　　（3）CCK-8法检测细胞的OD值来观察细胞的增殖情况。<br>　　（4）Transwell法观察细胞的迁移能力。<br>　　（5）流式细胞仪分析细胞表面膜分子CD80、CD86、MHCⅡ表达的改变。<br>　　（6）酶联免疫吸附实验（ELISA）检测细胞培养上清中IL-1β、IL-6、IL-33和TNF-α的蛋白表达水平。<br>　　结果：<br>　　（1）经测序等手段鉴定表明，Rac1载体构建成功，且将Rac1载体转入RAW264.7细胞可见其mRNA和蛋白表达均明显上调。<br>　　（2）CCK-8法分析显示，随着Rac1的表达水平升高，细胞增殖能力增强。<br>　　（3）Transwell结果表明，Rac1的表达水平与细胞迁移能力呈现正相关。<br>　　（4）Rac1对RAW264.7细胞膜表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ类分子的表达没有明显影响。然而，Rac1抑制剂及其特异性siRNA却可上调上述三种膜分子的表达。<br>　　（5）Rac1转染的RAW264.7细胞，IL-1β、IL-6的mRNA和蛋白水平均显著低于siRNA处理组及Rac1抑制剂组，而IL-33、TNF-α的表达各组之间没有显著差异。<br>　　结论:<br>　　Rac1的表达有助于RAW264.7细胞的增殖和迁移，并能显著抑制IL-1β和IL-6的表达，而对细胞的抗原提呈作用无显著影响。