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摘要目的：构建 miR-32-5p及 miR-30a基因单敲小鼠模型以及miR-32-5p/miR-30a基因双敲小鼠模型，为进一步探讨 miR-32-5p及miR-30a在血管钙化发生发展中的作用提供动物模型。<br>　　方法：<br>　　1）应用CRISPR/Cas9敲除技术，同时将mmu-miR-32-5p（鼠源性miR-32-5p）和mmu-miR-30a（鼠源性miR-30a）的single-guide RNA（单导RNA）与Cas9核酸酶的mRNA共同注射到小鼠受精卵中，一次性获得F0代双基因敲除的嵌合子小鼠。<br>　　2）将F0代miR-32-5p/miR-30a双基因敲除的嵌合子小鼠与野生型C57BL/6小鼠交配以获得F1代miR-32-5p/miR-30a双基因敲除的杂合子小鼠。<br>　　3）F1代miR-32-5p/miR-30a双基因敲除的杂合子小鼠互相交配以在F2代及F3代获得miR-32-5p及miR-30a基因单敲纯合子小鼠与miR-32-5p/miR-30a基因双敲纯合子小鼠。<br>　　4）所有繁殖的后代小鼠均提取鼠尾DNA经PCR扩增后测序鉴定其基因型。<br>　　结果：<br>　　1） 通过CRISPR/Cas9技术获得16只F0代miR-32-5p/miR-30a双基因敲除的嵌合子小鼠。<br>　　2） F1代获得了29只miR-32-5p/miR-30a双基因敲除的杂合子小鼠。并可以继续繁殖后代，每次生产约4～9只，平均存活率72%。<br>　　3） 在F2代及F3代获得了miR-32-5p及miR-30a基因单敲纯合子小鼠以及miR-32-5p/miR-30a基因双敲纯合子小鼠。<br>　　结论：<br>　　miR-32-5p与miR-30a基因单敲小鼠和miR-32-5p/miR-30a基因双敲小鼠模型的构建均取得成功，已获得了F2代及F3代的miR-32-5p及miR-30a基因单敲纯合子小鼠以及miR-32-5p/miR-30a基因双敲纯合子小鼠。