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摘要原发性肝癌（HCC）在全球恶性肿瘤排名中，发病率排名第五，死亡率排名第三。药物/基因共传递体系是一种新型的给药方法。聚阳离子高分子表面正电荷可以和细胞膜结合，其表面可修饰并可与基因发生静电结合，可以通过引入功能基团增强其靶向性，进而提高用药的安全性与准确性。本论文用半乳糖化壳聚糖（GC）与氟尿嘧啶(FUA)制备大分子前药半乳糖化壳聚糖氟尿嘧啶（GC-FUA），同时引入肝脏特异性表达基因—miR-122构建了大分子前药/基因共传递体系。并探讨了其在体外对肝癌细胞HepG2细胞的作用。<br>　　本论文结构如下：<br>　　第一部分，课题根据实验室前期方法合成了大分子前药-乳糖化壳聚糖-氟尿嘧啶(GC-FUA)，并制备其纳米体系。通过静电结合将miR-122mimic与大分子前药按不同的比例制备GC-FUA/miRNA-122共传递纳米体系。通过琼脂糖凝胶电泳观察基因与大分子前药的结合稳定程度，并用紫外分光光度法（UV）检测GC-FUA/miR-122纳米复合体系的载药率和基因包封率。同时，纳米粒度仪测量各组纳米体系的粒径与Zeta电位。结果显示成功制备出了GC-FUA/miR-122纳米复合体系，并且当GC-FUA：miR-122质量比＞256：1时，miR-122与 GC-FUA的结合稳定，未见基因片段的迁移。纳米复合体系的载药率为22.3%，基因包裹率是87.6%。<br>　　第二部分，本课题评估了共传递纳米体系的生物相容性。用CCK8法检测了空载体GC、共传递纳米体系对正常肝细胞（LO2细胞）、血管内皮细胞（ECs细胞）的细胞毒性作用。同时，检测了共传递纳米体系对 BSA的吸附作用。溶血实验检测纳米复合体系的溶血率。结果显示，GC对LO2细胞和ECs细胞的增殖有一定的促进作用，与游离5-Fu相比，GC-FUA/miR-122的蛋白吸附率明显的降低。GC-FUA/miR-122的溶血率均小于5%。证明GC-FUA/miR-122共传递纳米体系生物相容性良好。<br>　　第三部分，我们验证了共传递纳米体系的体外对肝癌的抗肿瘤作用。本论文通过转染荧光标记miR-122 mimics观察HepG2细胞对纳米体系的摄取情况。采用 CCK8法来检测纳米复合体系对肝癌细胞HepG2细胞的增殖抑制作用。用流式细胞仪（FCM）检测纳米复合体系的荧光摄取，同时检测纳米体系对 HepG2细胞凋亡的影响。此外，采用细胞划痕法和Transwell法分别检测纳米复合体系对HepG2细胞迁移能力和侵袭能力的影响。为了进一步验证纳米体系对肝癌细胞蛋白水平的作用，用Westrn Blot检测miR-122靶基因Bcl-2、Adam17的蛋白表达情况。CCK8结果显示，与游离5-Fu相比， GC-FUA/miR-122纳米体系可以明显抑制 HepG2细胞的增殖。流式结果显示，GC-FUA/miR-122能诱导 HepG2细胞的凋亡，其凋亡率高于游离5-Fu组、GC-FUA组与GC/miR-122组。细胞划痕和Tanswell结果验证GC-FUA/miR-122纳米体系可以抑制HepG2细胞的迁移和侵袭。Westrn Blot结果显示，GC-FUA/miR-122纳米体系下调miR-122靶基因Bcl-2、Adam17蛋白的表达。<br>　　结论：本课题成功构建了大分子前药-基因（GC-FUA/miR-122）共传递纳米体系。HepG2细胞对 GC-FUA/miR-122共传递纳米体系的摄取有一定的靶向性。与游离5-Fu、miR-122、GC-FUA相比，共传递纳米体系可抑制HepG2细胞的增殖作用，诱导肝癌细胞的凋亡，并抑制其迁移和侵袭，下调 miR-122靶基因 Bcl-2、Adam17蛋白的表达说明 GC-FUA/miR-122共传递纳米体系可以综合大分子前药和基因的优点，发挥协同抗肿瘤作用。