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摘要背景：胃癌是全球癌症死亡的第二大原因，且发病率逐年升高。2016年全球每年新发胃癌病例近100万，41％发生在中国。国内大部分患者首次诊断时已为进展期，然而目前可能的干预手段如手术、化疗、放疗及其他辅助治疗效果欠佳。因此，临床亟需新型干预治疗方法，靶向治疗晚期胃癌有很大的前景。<br>　　CCT（Chaperonin Containing TCP1）家族的CCT3有报道在肝癌、胆管癌等消化系统的恶性肿瘤中有着重要的作用，然而它在胃癌中的作用尚未报道。<br>　　本研究的目的是探讨CCT3在人胃癌组织及癌旁组织中表达量，并揭示CCT3在胃癌发生发展中的重要生物学功能，以及该基因对胃癌发生发展影响的机制探索，为新的个体化治疗策略提供实验理论依据。<br>　　方法：首先分析在线TCGA（The Cancer Genome Atlas）数据库中RNA测序（RNA-seq）数据并筛选出一个CCT3的基因，同正常样本相比其在胃癌组织显著高表达。通过免疫组织化学染色检测 CCT3在癌组织及癌旁组织的表达情况，通过实时定量 PCR反应（qRT-PCR）检测CCT3的表达情况。应用RNA干扰技术（RNAi）靶向沉默胃癌细胞株CCT3基因的表达，通过Cellomic细胞计数、MTT实验、克隆形成及凋亡检测对CCT3在胃癌细胞株（AGS、MGC-803、BGC-823）的生物学功能进行分析。在胃癌细胞株BGC-823中沉默CCT3基因的表达，检测裸鼠体内成瘤能力。<br>　　应用 Affymetrix人类全基因表达谱芯片检测 CCT3基因沉默前后胃癌细胞株BGC-823中全基因组mRNA表达丰度。用Ingenuity通路分析（IPA）差异表达基因，利用差异基因寻找下游潜在的候选基因。应用qRT-PCR和Western blot检测CCT3基因沉默后，部分候选下游通路基因mRNA和蛋白表达量。应用抗体芯片技术检测比较实验组和对照组两组样本中关键信号通路分子的变化，从分子水平揭示CCT3基因影响胃癌发生发展的作用机制。<br>　　结果：CCT3基因在胃癌组织和细胞株中高表达并且其主要定位于细胞核中。应用CCT3-shRNA靶向沉默胃癌AGS、BGC-823和MGC-803细胞中CCT3基因显著抑制胃癌细胞系的增殖能力。同样，抑制CCT3导致细胞凋亡明显增加。为了探讨CCT3在胃癌中可能的功能，本实验使用体外及体内肿瘤模型。体外实验，观察到在CCT3沉默的情况下胃癌细胞的克隆形成能力显著受到抑制；体内模型中，沉默 CCT3的 BGC-823细胞在裸鼠成瘤体积显著小于对照组。<br>　　通过CCT3-shRNA沉默CCT3后，859个基因表达量上调，887个基因表达量下调。CCT3的沉默导致蛋白激酶A（PKA）、Wnt/β-catenin、PPAR及cAMP介导的信号通路发生改变。使用qRT-PCR及蛋白印迹实验验证沉默BGC-823细胞中的CCT3，导致细胞应激及凋亡相关的基因发生改变，其中 MAP3K7、CDC42、CCND3的表达水平显著下调，CDK2、CDK6表达水平显著上调。<br>　　结论：综上所述，CCT3基因很可能是一个重要的分子，其过表达与胃癌的发生有关系。因此CCT3基因可能是新的胃癌相关的原癌基因，并在之后胃癌靶向治疗中有潜在的价值。进一步的研究（如过表达CCT3的胃癌稳定株及相关的动物模型）能够帮助我们探究及确定CCT3基因的致癌能力。