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摘要目的：<br>　　通过检测PDRG1在人肺癌细胞系中的表达水平，并建立PDRG1过表达及干扰细胞系，探究PDRG1对肺腺癌细胞增殖和凋亡及放射抗性的发生机制。<br>　　方法：<br>　　1.应用qRT-PCR和Western blot实验分别测定PDRG1在肺癌细胞系及正常细胞系中mRNA和蛋白表达水平。<br>　　2.采用脂质体转染技术建立PDRG1干扰瞬时表达肺癌细胞株，采用慢病毒转染技术建立PDRG1基因过表达细胞株；同时应用qRT-PCR和Western blot实验鉴定转染情况。<br>　　3.应用CCK8和流式细胞检测技术测定过表达组、干扰组、正常组PDGR1在A549细胞和95-D细胞系中的增殖及凋亡。<br>　　4.应用流式细胞检测技术检测肺癌细胞株对放射性损失引起凋亡的有效辐照剂量。<br>　　5.应用Western blot实验测定PDRG1与ATM、pP53等相关基因的关联性。并测定与P65通路是否存在相关性。<br>　　6.通过CCK8和流式细胞技术检测ATM抑制剂KU55933加入前后细胞增殖及凋亡前后的变化。<br>　　7.采用裸鼠荷瘤实验测定PDRG1对体外增殖能力的影响。<br>　　8.免疫组化测定体外实验中PDRG1与ATM、P53等基因的关系。<br>　　结果：<br>　　1.qRT-PCR及Western blot实验结果表明：与正常细胞系人胚肺成纤维细胞WI38相比，PDRG1在五种肺癌细胞系中mRNA和蛋白均呈高表达水平。但肺癌细胞系间仍有差异，其中PDRG1的表达在肺腺癌细胞系A549系中表达较高，在腺癌细胞系95-D表达较少。<br>　　2.qRT-PCR和Western blot实验结果显示了PDRG1过表达和干扰质粒都可以在A549和95-D细胞系表达，且mRNA和蛋白表达水平呈相应的变化。<br>　　3.CCK-8和流式细胞技术试验表明了PDRG1过表达能促进增殖抑制凋亡，进一步验证了PDRG1过表达及干扰瞬时表达肺癌细胞株A549和95-D细胞构建成功。<br>　　4.流式细胞技术实验表明了PDRG1基因在Co60辐照剂量为8Gy，9小时左右的时候能引起较为明显的差异的凋亡。<br>　　5.Western blot实验表明了辐照能够促进PDRG1基因的表达，PDRG1基因的表达与ATM基因成正比，与P53基因成反比；然而与P65通路未见明显关系。<br>　　6.流式细胞技术与CCK8实验表明了PDRG1过表达能增强肺癌细胞增殖，抑制细胞凋亡，加入ATM抑制剂后PDRG1过表达的细胞系增殖明显减弱，凋亡增强。而对照组加入ATM抑制剂后变化不大。<br>　　7.裸鼠荷瘤实验结果表明了Co60辐射后的细胞增殖能力减弱，PDRG1基因过表达能促进受到辐射后的细胞增殖。<br>　　8.免疫组化测定裸鼠皮下成瘤的肿瘤组织证实辐射可以激活PDRG1基因，并且PDRG1基因表达量与ATM成正比，与P53基因成反比。<br>　　结论：<br>　　1.PDRG1在人多种肺癌细胞系中均呈高表达水平，并构建稳定的过表达及瞬时干扰的细胞系，通过体内体外实验证明PDRG1在肺癌细胞系中属于一种癌基因，促进增殖，抑制凋亡。<br>　　2.放射性损伤能促进PDRG1表达增多,检测构建的过表达和干扰细胞系中PDRG1及ATM、P53、P65等基因在辐照前后变化。发现PDGRG1基因能够增强肿瘤的放射抗性，并通过ATM-P53通路发挥作用。