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摘要衰老（Aging）是生物个体随年龄增长而发生的不可逆的退行性变化。目前，人口老龄化已成为全球性的社会问题。为了延缓衰老，临床上常使用一些合成的抗氧化剂来清除体内自由基及代谢废物，但长期用药会对机体产生毒副作用。因此，探索和开发天然抗氧化剂对于延缓衰老具有重要意义。<br>　　糖尿病（Diabetes mellitus，DM）是一种全球性的内分泌代谢疾病，常伴随着各种急慢性并发症的发生，致死率高。目前，糖尿病的主要治疗方法包括注射胰岛素和口服降血糖药物，但这些方法在长期使用中会产生毒副作用，因此，寻找高效、无毒的天然降血糖药物仍是医学界的重要研究课题。<br>　　杏鲍菇[Pleurotus eryngii（DC.etFr.）Quel.]是我国广泛栽培的一种食药兼备的珍稀蕈菌，具有丰富的营养价值和广泛的生物活性。本课题以杏鲍菇（P. eryngii）为出发菌株，进行液体深层发酵获得菌丝体。通过水提醇沉法获得杏鲍菇菌丝体多糖（P. eryngii mycelia polysaccharides，PMPS），分离纯化后得到PMPS-1和PMPS-2，并对两种多糖的结构及其抗衰老、抗糖尿病的生理活性进行研究，研究结果如下：<br>　　（1）杏鲍菇菌丝体多糖的提取及分离纯化：为保持多糖的生物活性，采用较为温和的水提醇沉法提取多糖，去蛋白处理后，PMPS得率为22.89±1.73mg/g。采用DEAE-52纤维素离子交换柱层析和Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析对PMPS进行分级纯化，得到纯化组分PMPS-1和PMPS-2，得率分别为463.42±25.09mg/g和287.65±16.71mg/g。<br>　　（2）杏鲍菇菌丝体多糖的结构测定：①紫外扫描光谱（Ultraviolet spectrum）分析结果表明，PMPS-1和PMPS-2均不含蛋白质和核酸。②高效液相色谱（High pressure liquid chromatograph，HPLC）分析结果表明，杏鲍菇PMPS-1为不均一多糖，重均分子量（Weight-average molecularweight，Mw）为3.24×105Da；杏鲍菇PMPS-2为均一多糖， Mw为1.95×104Da。③气相色谱（Gas chromatograph，GC）分析结果显示，PMPS-1含有甘露糖和葡萄糖，其质量分数为12.13%和87.87%，摩尔比为1.00:7.24；PMPS-2含有木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖，其质量分数为3.21%、17.47%、14.66%和64.66%，摩尔比为1.00:4.54:3.81:16.79。④红外光谱（Fouriertransform infrared spectroscopy， FT-IR）分析结果显示，PMPS-1和PMPS-2均为β-型糖苷键连接的呋喃糖。⑤扫描电镜结果说明，PMPS-1分子量较大，可能具有长链结构或多分枝结构，分子之间作用力较小，易产生交叉粘连；PMPS-2分子量较小，分子间相互作用力相对较大，可能形成紧密的结构。<br>　　（3）杏鲍菇菌丝体多糖抗氧化及抗衰老功效：①体外抗氧化试验表明，杏鲍菇PMPS-1和PMPS-2具有清除羟基自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的能力。PMPS-2 的抗氧化能力强于 PMPS-1，可能与 PMPS-2 具备较低的分子量、单糖组成中含有木糖和半乳糖等结构特征相关。②体内抗氧化试验证明，杏鲍菇PMPS-1和PMPS-2可以显著抑制小鼠体重和胸腺指数的异常降低，提高组织器官中超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-Px）和总抗氧化能力（Total antioxidant capability，T-AOC）活性，降低丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量，提高皮肤组织含水率及羟脯氨酸（Hydroxyproline， HYP）含量，表明PMPS-1和PMPS-2具有较强抵制氧化应激的活性。③对肝脏、大脑、皮肤和胸腺的组织病理学观察结果表明，PMPS-1和PMPS-2能够减少组织中坏死及凋亡细胞的数量，缓解氧化应激对组织器官的病理性损伤。<br>　　（4)杏鲍菇菌丝体多糖降血糖及抗糖尿病功效：①体外试验表明， PMPS-1和PMPS-2对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制活性，且PMPS-2的抑制效果强于PMPS-1。②对小鼠空腹血糖的影响：PMPS-1和PMPS-2灌胃处理能够降低糖尿病小鼠血糖水平。③对小鼠氧化应激的影响：PMPS-1和PMPS-2均能显著抑制糖尿病小鼠肝脏、肾脏和胰脏组织中SOD、GSH-Px、过氧化氢酶（Catalase，CAT）和T-AOC活性的降低及脂质过氧化物（Lipid peroxide，LPO）和MDA水平的升高，对氧化应激引起的肝脏、肾脏和胰脏的损伤有较强的保护作用。④对小鼠脂代谢的影响：PMPS-1和PMPS-2能显著抑制糖尿病小鼠血清中甘油三酯（Triacylglycerols，TG）、总胆固醇（Total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（Very low-density lipoprotein cholesterol，VLDL-C）水平的升高以及高密度脂蛋白胆固醇（High-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）水平的降低，表明杏鲍菇菌丝体多糖能够改善小鼠的脂代谢紊乱情况。⑤对小鼠血清中炎症因子的影响：PMPS-1和PMPS-2能显著抑制糖尿病小鼠血清中核转录因子-κB（Nuclear factor-κB， NF-κB)、肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor，TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6， IL-6）和C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）水平的升高，说明杏鲍菇菌丝体多糖能够减轻糖尿病小鼠机体的炎症反应。⑥杏鲍菇菌丝体多糖对糖尿病小鼠器官的修复作用：PMPS-1和PMPS-2可显著降低小鼠血清中的谷丙转氨酶（Alanine transaminase， ALT）和谷草转氨酶（Aspartate transaminase，AST）的活性，降低尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）和肌酐（Creatinine，CRE）的水平，提高白蛋白（Albumin，ALB）水平，抑制器官指数的升高，以及减轻小鼠肝脏、肾脏和胰脏的病理学损伤，说明杏鲍菇菌丝体多糖能够在高糖状态下保护肝脏、肾脏和胰脏免受损伤。<br>　　上述结果表明，PMPS-1和PMPS-2 具有体外和体内抗氧化活性，能够减轻氧化应激损伤，延缓衰老；同时能改善糖尿病小鼠的糖代谢和脂代谢，减轻氧化应激和炎症反应对机体的损伤，对糖尿病及其并发症有预防和治疗作用。