摘要目的:比较类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者与高危人群及健康人群的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155表达水平的差异,分析患者miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155表达水平与其抗环瓜氨酸肽抗体(CCP),类风湿因子(RF),C-反应蛋白(CRP),红细胞沉降率(ESR)的结果是否存在相关性,初步探索miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155在RA中的作用机制,为RA的诊断提供可靠的实验室指标。<br> 方法:选取符合类风湿性关节炎诊断标准的患者71例,类风湿性关节炎高危人群(EULAR评分小于6分者)46例,健康对照人群40例作为对照组,取空腹外周血2ml,应用差速密度梯度离心法分离得到外周血单个核细胞后再提取总RNA。对得到的总RNA进行反转录得到cDNA,然后应用实时荧光定量PCR (real-time PCR)技术检测miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155的含量。与常规临床诊断类风湿性关节炎的实验室指标 CCP,RF,CRP,ESR的结果进行比较,进一步分析miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155与类风湿性关节炎的关系。构建受试者工作特征曲线(ROC曲线),通过比较曲线下面积(area under the curve ,AUC)分析miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155及三者的联合检测诊断类风湿性关节炎的价值。<br> 结果:1.RA患者外周血单个核细胞中的miRNA-16表达量与其CCP,RF,CRP,ESR的结果正相关(p<0.05);miRNA-150的表达量也与其CCP,RF,CRP,ESR的结果正相关(p<0.05);而miRNA-155的表达量与CCP,RF,CRP的结果正相关(p<0.05),与ESR无相关性(p>0.05)。<br> 2.高危人群组外周血单个核细胞中的miRNA-16表达量与其CCP,RF的结果正相关(p<0.05),与CRP和ESR的结果不相关性(p>0.05);miRNA-150的表达量与其CCP结果正相关(p<0.05),与RF,CRP,ESR的结果不相关(p>0.05);而miRNA-155表达量与其CCP,RF,CRP,ESR的结果不相关(p>0.05)。<br> 3.外周血单个核细胞中的miRNA-16表达量在RA患者和健康对照组,以及高危人群和健康对照组之间有统计学差异(p<0.05),在 RA 患者与高危人群无统计学差异(p>0.05);miRNA-150的表达量在RA患者和健康对照组,以及高危人群和健康对照组之间有统计学差异(p<0.05),在 RA 患者与高危人群之间无统计学差异(p>0.05);miRNA-155的表达量在RA组与高危组,RA组和健康对照组之间有统计学差异(p<0.05),在高危人群和健康对照组之间无统计学差异(p>0.05)。<br> 4. 在EULAR评分的基础上,构建的ROC曲线,miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155以及三者联合,应用于诊断RA时,AUC分别为0.662,0.650,0.544和0.814,灵敏度分别为67.6%,70.4%,64.3%和82.9%,特异性分别为54.5%,51.7%,53.8%和65.5%。.<br> 结论:1. miRNA-16、miRNA-150和miRNA-155在RA患者及RA高危组PBMCs中表达升高,提示miRNA-16、miRNA-150和miRNA-155可能与RA发病有关。<br> 2. RA患者组的miRNA-16、miRNA-150和miRNA-155与CCP,RF,CRP是正相关,提示三者可能与RA的活动程度相关。<br> 3. 在EULAR评分的基础上,miRNA-16,miRNA-150和miRNA-155联合应用于诊断RA相较于三者的单独应用具有更好的诊断价值。
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