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摘要目的：<br>　　探索不同浓度的星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体两周内的收缩性及细胞外基质合成的影响。<br>　　方法：<br>　　1.体外分离山羊颞下颌关节盘，Ⅰ型胶原酶过夜消化，提取关节盘细胞；单层培养山羊颞下颌关节盘细胞。甲苯胺蓝染色和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色鉴定P3代细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）的分布。<br>　　2.利用24孔板制作直径为5mm,深度为10mm的圆柱形琼脂糖模具；每个琼脂糖井用完全培养基连续换液一周。<br>　　3.收集P3代关节盘细胞，以5.5×106个细胞按照对照组和不同浓度的星孢菌素（Staurosporine）组（0.1nM，1nM，10nM，100nM）种入每个琼脂糖井，每天每井相应换液，培养至一周和两周。<br>　　4.观察自组装基体的形态变化；冰冻切片做天狼猩红染色展示胶原分布，番红染色显示糖胺聚糖（Glycosaminoglycan，GAGs）的分布；免疫组织化学染色显示Ⅰ型胶原、及α-肌动蛋白（α-Smooth muscle actin，α-SMA）的分布；ELISA和Blyscan试剂盒检测不同时间段细胞外基质含量的变化。<br>　　结果：<br>　　1.光学显微镜下P0，P1，P2及P3代的不同代次细胞形态：从P0代到P3代，细胞形态逐渐变为扁平的长梭形和多边形，其中P3代细胞形态明显粗大。P3 代细胞甲苯胺蓝染色和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色为阳性，显示细胞外基质糖胺聚糖（GAGs）和Ⅰ型胶原的合成。<br>　　2.星孢菌素组和对照组细胞均在琼脂糖井内自组装成球形，一周内各组基体都有收缩现象，两周内基体形态变化基本稳定；其中，10nM 星孢菌素组直径和湿重最大（P<0.01 ）；两周时各组基体湿重有增加，但直径增加不是很明显（P<0.01）。<br>　　3.一周和两周冰冻切片染色显示：各组基体天狼猩红，番红及Ⅰ型胶原免疫组织化学染色为阳性，星孢菌素组更明显，尤其10nM组为强阳性；而星孢菌素组相对于对照组α-SMA免疫组织化学染色为弱阳性。<br>　　4.ELISA 检测的自组装基体内的Ⅰ型胶原含量和 Blyscan 试剂盒检测的GAGs含量显示星孢菌素组高于对照组,其中10nM组最明显（P﹤0.01）；另外，各组基体在两周时细胞外基质的含量高于一周组(P<0.01)。<br>　　结论：<br>　　不同浓度星孢菌素对于预防自组装基体的收缩有一定效果,但不是非常突出，它更有利于自组装基体细胞外基质的合成。