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摘要目的：<br>　　探索GRASP65（Golgi reassembly stacking protein65）在JNK信号通路调节人胃癌细胞的增殖、凋亡及周期中的作用和机制。<br>　　方法：<br>　　首先，将高表达 GRASP65的胃癌细胞株 SGC7901用三条siRNA特异片段应用转染试剂进行瞬时转染，减少此胃癌细胞中GRASP65蛋白的表达量。然后，RT-qPCR及Western blot用于观察下调效果最好的片段进行后续实验。下调成功后将JNK信号通路抑制剂加入各组细胞。实验分组为阴性对照组（ NC组）、阴性对照加药组（NC+SP组）、下调组（si-GRASP65组）、下调加药组（si-GRASP65+SP组）。最后，用 CCK-8试剂盒检测各组细胞生长状况，流式细胞术观察各组细胞的凋亡以及周期的改变情况，每个组细胞内蛋白 bcl-2、cleaved caspase3等表达量用Western blot方法检测。<br>　　结果：<br>　　Western blot以及RT-qPCR的结果提示，在SGC7901细胞中，片段编号为1230（si-1230组）的siRNA对GRASP65的蛋白和mRNA表达的抑制效果最好。CCK-8实验结果表明，与NC组相比，NC+SP组细胞的增殖显著减少（P<0.001），而si-GRASP65组与si-GRASP65+SP组之间细胞增殖情况无明显差别（P＞0.05）。流式细胞术指出，NC组凋亡率明显比 NC+SP组低（P<0.01），而下调组加药前后的凋亡率的统计结果显示没有明显差别（P＞0.05）。NC+SP组细胞阻滞于G2期的细胞数明显多于 NC组（P<0.001），而 si-GRASP65+SP组阻滞于 G2期的细胞数明显少于 NC+SP组（P＜0.05）。Western blot结果表明， NC+SP组中细胞内表达的 cleaved caspase3的蛋白量比 NC组高（P<0.001），si-GRASP65+SP组细胞cleaved caspase3的蛋白表达量明显低于si-GRASP65组（P<0.01），而bcl-2的结果与之相反。GRASP65在NC+SP组中的表达量明显低于NC组（P<0.001），而在下调组与下调加药组中其表达量没有明显差别。各组细胞中P-JNK和GM130蛋白的表达变化与GRASP65一致。关于c-jun，NC+SP组的表达低于NC组（P<0.001），而si-GRASP65+SP的表达高于si-GRASP65组（P＜0.05）。<br>　　结论：<br>　　GRASP65参与了JNK信号通路对人胃癌细胞的增殖、凋亡和周期等生物学行为的调控过程，并且是此通路中的关键因子。其机制可能是通过改变JNK的磷酸化状态，调节cleaved caspase3、bcl-2、c-jun等蛋白表达量从而对胃癌细胞增殖、凋亡以及周期产生影响。