换一批
换一批摘要目的：<br> 为了研究组DOT1L在骨肉瘤细胞有丝分裂期的变化，及对有丝分裂期进程的影响<br> 方法：<br> 利用细胞周期同步化方法，观察骨肉瘤细胞U2OS在有丝分裂期前中期到出有丝分裂期各阶段DOT1L的变化；并用特异性抑制剂 EPZ5676抑制H3K79甲基化水平，用Western blot及活细胞荧光激光共聚焦检测其对有丝分裂期进程的影响。<br> 结果<br> 在骨肉瘤细胞U2OS中，H3K79me2,3水平在有丝分裂期前中期下降，并随着细胞出有丝分裂期，H3K79me2,3水平逐渐增加，使用抑制剂进一步降低其在有丝分裂期的水平并抑制其随后的增加，对有丝分裂期中期到后期的转化过程影响不显著，但会引起姐妹染色单体分离错误出现的比例增高。<br> 结论：<br> 1.DOT1L的C-terminal在骨肉瘤细胞的有丝分裂期发生磷酸化，且磷酸化激酶是CDK1/cyclinB<br> 2.DOT1L底物H3K79的甲基化水平在骨肉瘤细胞的有丝分裂期下降<br> 3.抑制骨肉瘤细胞的有丝分裂期的DOT1L1甲基化转移酶活性，H3K79的甲基化水平进一步下降，虽然不影响细胞周期进程及细胞增殖，但是使有丝分裂过程中姐妹染色单体分离错误的比例增高。
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