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摘要研究背景:<br>　　卵巢癌是女性癌症死亡的主要原因，约 70%的卵巢癌患者发现时为晚期，乳腺癌-卵巢癌易感基因（breast cancer susceptibility gene，BRCA），为肿瘤抑癌基因，是目前发现与卵巢癌发生发展中最相关的肿瘤易感基因。BRCA 在细胞DNA双链损伤（double-strand breaks，DSBs）后 DNA同源重组（Homologous recombination，HR）修复、细胞周期调控、细胞凋亡中发挥关键作用。如果BRCA突变可导致染色体不稳定，阻止细胞正常分化，继而发生恶变，最终导致肿瘤的发生。研究发现，BRCA 在整体卵巢癌中的突变率约为 5.8%~24.8%，其中胚系突变约为15%，体细胞突变约为5%，但其基因突变携带者的患癌风险却明显增高，70岁时BRCA1和BRCA2患乳腺癌的风险分别为44~78%和31~56%，患卵巢癌的风险分别为18%~54%和2.4%~19%。此外，BRCA突变型卵巢癌倾向于高级别卵巢癌，子宫内膜样或浆液性卵巢癌，具有更长的整体生存期（overall survival，OS）和无进展生存期（progression-free survival，PFS），且对铂类化疗敏感性更高。NCCN 指南建议对高风险患癌人群行 BRCA 检测，建议 BRCA突变携带者 30~35 岁后行阴道超声检查（Transvaginal ultrasound，TVUS）和CA125 水平测定，以此预防卵巢肿瘤的发生。美国妇产科医师协会（American College of Obstetricians and Gynecologists，ACOG）和妇科肿瘤协会（The Society of Gynecologic Oncology，SGO）建议生育完成后，35~40岁的BRCA1突变携带者或40~45岁的BRCA2突变携带者建议行双侧乳房切除术和双侧输卵管卵巢切除术以此降低乳腺癌和卵巢癌的患癌风险。PARP抑制剂在BRCA1/2突变型乳腺癌和卵巢癌患者中产生的“化学合成致死”效应，给卵巢癌患者个体化治疗带来了福音。第二代测序技术（next-generation sequencing，NGS）的发展及美国医学遗传学与基因组学学会（American College of Medical Genetics and Genomics，ACMG）指南使得BRCA检测更为方便和规范。血清肿瘤标志物（serum tumor markers，STM）CEA、CA125、CA199、HE4作为卵巢癌患者的常规检查手段，其水平升高可提示卵巢癌的发生，是卵巢癌发生、恶化及复发的重要指标，但其与BRCA突变关系尚未明确，BRCA联合STM表达水平检测对卵巢癌的预后价值有待研究。<br>　　目的:<br>　　本研究通过高通量测序方法（next-generation sequencing，NGS）检测家族性（familial ovarian cancer，FOC）和散发性卵巢癌（sporadic ovarian cancer，SOC） BRCA突变，比较两组BRCA变异情况，分析与年龄、病理分期、远处转移及输卵管结扎等临床病理特征及与患者首次入院时（入组患者入院前未接受任何治疗）STM 表达水平之间的关系。分析家族史、BRCA、STM 表达水平与卵巢癌患者PFS关系，并联合上述指标评估对卵巢癌患者的预后价值。<br>　　方法:<br>　　选取2013年1月~2014年12月就诊于郑州大学附属肿瘤医院的66例SOC和 31 例 FOC 患者，入组患者均经病理诊断为卵巢癌，详细咨询患者的家族史（family history，FH）并签署知情同意书。每位患者首次入院时未经任何治疗，抽取静脉血采用化学发光法检测血清 CEA、CA125、CA199、HE4 表达水平，记录患者的诊断年龄、临床分期、转移情况及绝经史等临床病理特征。入组患者均在肿瘤细胞减灭术后规律采用紫杉醇类联合铂类一线化疗方案进行化疗，并通过CA125、影像学及临床症状等追踪患者的疾病进展情况。用QIAGEN血液基因组DNA提取试剂盒提取患者血液标本中的DNA，用NGS方法构建上机文库，通过Miesq测序平台上机测序，用ACMG指南分析BRCA具体突变情况。如果BRCA发现突变需通过ABI3130进行Sanger测序进行验证。实验结果数据使用SPSS 21.0 和GraphPad Prism5软件进行分析。<br>　　结果:<br>　　1 BRCA在FOC和SOC患者的基因突变率分别为54.8%（17/31）和19.7%（13/66），具有显著差异（P < 0.001），而BRCA1和BRCA2突变率相比无相关性（P>0.05）。<br>　　2 31例FOC中10例患者自身曾患乳腺癌（乳腺癌均为第一肿瘤），平均发病年龄为46.5岁（95%CI 42.7-50.3），再发卵巢癌的平均发病年龄为54.2岁（95%CI 50.1-58.3），平均发病间隔为7.5年（95%CI 3.9-11.1）；进一步分析发现同时患乳腺癌及卵巢癌的患者却与SOC患者并未发现BRCA突变相关性。<br>　　3 BRCA在卵巢癌的平均诊断年龄为51.0岁，在BRCA1和BRCA2中分别为51.7和52.1岁（P>0.05）。此外，BRCA突变与临床分期、绝经史等临床指证无关（P>0.05）。<br>　　4 血清STM中CEA与CA199成线性相关（P<0.001，r=0.895），CA125与HE4成线性相关（P<0.001，r=0.442），其中CEA、CA199、HE4与卵巢癌的家族史、BRCA突变情况无关（P>0.05），而CA125与家族史、BRCA突变情况有关（P<0.05）。<br>　　5 进一步分析发现，SOC中BRCA突变患者的CA125表达水平显著增高，相比野生型具有显著性差异（P<0.05），而在FOC中BRCA突变情况与CA125表达水平无关（P>0.05）；此外，在BRCA突变型OC中HE4倾向于高表达，但无统计学差异。<br>　　6 多因素回归方程分析显示，卵巢癌的家族史、CA125 高表达（CA125 >2000U/ml）与BRCA突变有关（P<0.05），卵巢癌中有家族史的优势比（odds ratios，OR）为12.135（95%CI，2.786-52.860），CA125（>2000U/ml）的OR值为11.450（95%CI，2.437-53.789）。<br>　　7 生存分析示，FOC患者、CA125高表达（CA125 > 2000U/ml）、BRCA突变组PFS明显延长，CA125高表达联合BRCA突变、家族史较其他组的PFS明显延长。<br>　　结论:<br>　　1 FOC、CA125高表达患者中更易发生BRCA突变，可作为筛选BRCA突变的重要指标。<br>　　2 在SOC患者中，CA125高水平表达者BRCA患癌风险增加，对SOC患者中BRCA检测咨询有一定的指导意义。<br>　　3 CA125高表达、有FH、BRCA突变组的OC患者PFS显著增高，CA125联合FH、BRCA可有效评估OC患者的预后。