检索历史 清除

摘要肺癌无论发病率还是死亡率在2012年全球癌症调查中均居恶性肿瘤之首。尽管采用新辅助化疗等多种治疗方案，但占肺癌绝大部分的肺腺癌五年生存率并未有明显提高。已有研究文献表明，肿瘤微环境由多种成分构成，在肿瘤演进中扮演十分重要的角色。其中作为重要组成部分的肿瘤相关巨噬细胞（Tumor associated macrophage，TAMs）能够通过分泌大量的细胞因子并结合相应受体，从而调节肿瘤细胞的相关生物学行为。白介素22（IL-22）及其受体白介素22受体分子-1（IL-22R1）分别特异性地表达于免疫细胞和上皮细胞，能够为研究TAMs和肺腺癌之间联系提供新的途径。<br>　　为此本研究拟利用免疫组化、免疫荧光、Meta分析和生物信息学等实验技术和方法分三个部分探讨TAMs对肺腺癌的作用及可能机制：第一部分探讨TAMs在肺腺癌组织中的分布情况及对肺腺癌预后影响；第二部分检验TAMs对肺腺癌生物学行为的影响及可能机制；第三部分研究 IL-22/IL-22R1 通路在介导 TAMs 对肺腺癌预后影响中所发挥的作用。<br>　　得到如下主要实验结果：<br>　　1. TAMs在肺腺癌间质中主要以M2型TAMs为主，在肺腺癌发生发展中起到促进作用。<br>　　2. M2型TAMs是作用肺腺癌预后的危险因素之一。<br>　　2.1 生存分析（Kaplan-Meier法）显示，M2型TAMs与肺腺癌病人总生存期（Overall Survival，OS）负相关。<br>　　2.2单因素和多因素Cox生存分析指出，M2型TAMs在肺腺癌中的密度分布可以作为一个独立的预测病人预后的指标。<br>　　2.3临床病理资料分析显示，M2型TAMs在肿瘤间质内密度的变化可能是引起肿瘤增生的因素之一。<br>　　3. IL22/IL-22R1信号通路与M2型TAMs发挥上述作用有关。<br>　　3.1分析表达谱芯片发现，IL-22/IL-22R1通路在M2型TAMs作用的肺腺癌细胞系A549中表达异常。<br>　　3.2 免疫荧光和免疫组织化学双标染色证实M2型TAMs能够分泌IL-22。<br>　　3.3 TCGA数据分析和免疫组化染色证实肺腺癌间质中M2型TAMs影响肿瘤区域IL-22R1分子的表达量。<br>　　4. IL-22R1高表达于肺腺癌组织中的肿瘤区域，在癌旁相关正常肺组织区域较少或不表达。<br>　　5. IL-22R1在肺腺癌中的表达是肺腺癌预后的危险因素之一。<br>　　5.1 免疫组化结果统计显示IL-22R1的表达情况与肺腺癌病人临床预后呈负相关。<br>　　5.2 单因素和多因素COX生存分析证明IL-22R1作为独立的危险因素，可以判断肺腺癌病人预后。<br>　　5.3 IL-22R1表达量与肺腺癌临床病理参数分析显示，IL-22R1与肺腺癌的肿瘤大小有关系，提示我们IL-22R1可能参与影响肺腺癌的增生。<br>　　5.4 Meta分析提示IL-22R1表达是肺腺癌病人预后的危险因素之一，其在肿瘤中表达量越高，病人的临床预后越差。<br>　　6. 肿瘤间质中M2型TAMs增高并且肺腺癌细胞高表达IL-22R1的患者预后相对较差。<br>　　通过对结果的描述以及结合本实验课题，总结一下结论：<br>　　1．改进的免疫组化双标染色方法证实在肺腺癌间质中占肿瘤相关巨噬细胞 80%的M2型TAMs在肺腺癌发生发展中起到促进作用。<br>　　2.首次揭示了 IL-22/IL-22R1 通路可能是肿瘤相关巨噬细胞影响肺腺癌肿瘤生物学行为的关键通路之一。<br>　　上述结果将进一步为了解TAMs在肺腺癌恶性生物学行为调控中的作用、鉴定肺腺癌预后的标记物以及制定肺腺癌靶向治疗策略提供借鉴。