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明胶水凝胶/介孔钙硅纳米微球-BMP-2复合人工骨膜的制备和促成骨研究

摘要目的:<br>  以光交联明胶水凝胶(GelMA)为载体,在水凝胶中加入负载BMP-2的介孔钙硅纳米微球(MCSNs)构建出具有膜结构的人工骨膜材料,并研究其辅助促成骨能力。<br>  方法:<br>  通过改良的模板法合成介孔钙硅纳米微球(MCSNs),并使用浸入冻干法在MCSNs中复合BMP-2,最后将负载BMP-2的微球掺入未交联的GelMA溶液中共同光交联成为膜状。通过扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)红外光谱(FTIR)对MCSNs-BMP-2和复合人工骨膜进行表征,以力学测试仪对复合膜进行力学表征。通过ELISA法探究BMP-2的释放情况。将复合支架与大鼠间充质干细胞(BMSCs)共培养,通过扫描电子显微镜、CCK-8 法、碱性磷酸酶(ALP)染色和活性测定及钙结节染色及含量测定,研究人工骨膜对间充质干细胞的黏附增殖及分化的影响。使用大鼠颅骨缺损模型评价人工骨膜材料的体内促成骨能力,通过micro-CT、H&E染色、MASSON染色CD31免疫组化染色,研究其促成骨和促血管生成能力。<br>  结果:<br>  第1、14及28天,BMP-2累积释放量为21.2%±1.4%、58.5%±5.6%及68.5%±6.7%。复合支架与间充质干细胞共培养,电镜观察下细胞形态良好,ALP染色活性及产生的钙结节含量较对照组明显增多。在颅骨缺损模型中,复合人工骨膜组的新生骨含量(BV/TV)远高于对照组,且能观察到新生骨连接以及更多的新生血管生成。<br>  结论:<br>  复合人工骨膜在体内能有效缓释BMP-2,模拟骨膜的促骨组织修复过程,且具有一定的力学性能。复合人工骨膜材料拥有良好的生物相容性和生物活性,能促进间充质干细胞的增殖和分化,且在大鼠体内有明显快速促进骨膜修复从而促进成骨的能力。

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