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摘要研究背景：<br>　　弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma,DLBCL）是一组临床症状、免疫分型、组织形态学及遗传分子学均具有异质性的恶性淋巴组织肿瘤，是最常见的非霍奇金淋巴瘤 （non Hodgkin lymphoma,NHL），约占所有NHL的30%～40%。DLBCL的中位发病年龄在60～70岁，大多发生于老年人，但临床上也时有青年或青少年患者。目前临床的标准治疗方案是R-CHOP方案，但仍有30%～40%的患者治疗无效或治疗后迅速复发，疾病进展快，预后差。探究基因在DLBCL发生发展中的作用，有利于发现其致病机制，为DLBCL的临床治疗提供一定理论基础，有助于发展个性化治疗方案。<br>　　SEL1L（human sel-1 like gene）基因定位于人染色体14q23.3-q31，由Biunno及其同事在1997年首次从人基因组中分离，其序列与秀丽隐杆线虫sel-1基因序列相似，近年来大多数研究集中于SEL1L在癌症进展中的作用。目前，SEL1L在多种肿瘤中均有研究。Orlandi等发现SEL1L在117例乳腺癌病例中约2/3低表达，总生存率分析显示SEL1L的表达与预后不良有关。Granelli等在检测35例食管癌病例的SEL1L mRNA和蛋白时显示，在低级别食管癌中低表达，在高级别食管癌中高表达，在正常食管鳞上皮中基本不表达，另有5例完全不表达SEL1L且这5例患者的预后最差。SEL1L在淋巴瘤中的表达情况及其意义目前国内外尚未见相关报道。<br>　　研究目的：<br>　　探讨SEL1L、BCL2、BCL6在DLBCL中的表达及其意义。<br>　　研究方法：<br>　　（1）采用免疫组织化学方法检测123例DLBCL组织中BCL2蛋白、BCL6蛋白、EL1L蛋白的表达及60例反应性淋巴组织增生（reactive lymphoid hyperplasia,RLH）组织中SEL1L的表达。<br>　　（2）采用Western Blot法检测BCL2蛋白及SEL1L蛋白在DLBCL细胞株LY-10及SUDHL-4中的表达。<br>　　（3）设计3条siRNA-SEL1L（siRNA-983、siRNA-1666、siRNA-200）干扰DLBCL细胞株中SEL1L的表达，并设置阴性对照组（siRNA-NC）及空白对照组（Mock）。（4）应用lipofectamineTM3000转染DLBCL细胞株LY-10、SUDHL-4，转染48小时后，收集细胞，应用RT-PCR和Western Blot法检测SEL1L mRNA量和SEL1L蛋白量。<br>　　（5）应用MTT比色法、Transwell小室、流式细胞术检测转染后细胞株的增殖能力、侵袭能力及凋亡情况。<br>　　（6）Western Blot检测转染siRNA-SEL1L后BCL2的表达量。研究结果：<br>　　（1）免疫组化显示SEL1L蛋白在DLBCL中的高表达率明显高于RLH中的高表达率（69.9%vs 25.0%，P＜0.05），与各临床病理因素均无关。BCL2蛋白在DLBCL中的阳性率是83.7%，与免疫表型、原发位置及Ann Arbor分期有关（P＜0.05）；SEL1L与BCL2蛋白在DLBCL中的表达存在相关性（r=0.227，P＜0.05）。BCL6蛋白在DLBCL中的阳性率是61.0%，与免疫表型有关（P＜0.05）；BCL6与SEL1L在DLBCL中的表达未见明显相关关系（P＞0.05）。<br>　　（2）SEL1L蛋白在DLBCL细胞株LY-10及SUDHL-4中均呈阳性表达。<br>　　（3）转染3条siRNA-SEL1L后，siRNA-1666组的mRNA及蛋白表达量均较siRNA-NC组和空白对照组显著降低（P＜0.05）。<br>　　（4）MTT结果显示，转染3条siRNA-SEL1L后，SEL1L-1666组较siRNA-NC组和Mock组细胞增殖能力明显下降（P＜0.05）。<br>　　（5）流式细胞术结果表明，转染3条siRNA-SEL1L后，SEL1L-1666组较siRNA-NC组和Mock组细胞凋亡率显著增加（P＜0.05）。<br>　　（6）Transwell小室实验结果表明，转染3条siRNA-SEL1L后，SEL1L-1666组较siRNA-NC组细胞的侵袭及迁移能力均降低（P＜0.05）。<br>　　（7）siRNA-SEL1L转染后BCL2表达量未见明显改变（P＞0.05）。<br>　　结论：SEL1L在DLBCL组织和细胞株中均高表达；通过siRNA降低SEL1L表达后弥漫大B细胞株LY-10的增殖能力、迁移及侵袭能力降低，细胞凋亡率增加。该研究结果显示SEL1L可能在DLBCL的发生发展过程中起重要作用，抑制SEL1L的表达可能为DLBCL的靶向治疗提供新途径。