摘要目的:<br> 神经胶质细胞瘤是原发于胶质细胞的颅内肿瘤,占中枢神经系统恶性肿瘤的80%以上,因其高复发、高致残及高致死率,胶质瘤已成为世界难以攻克的难题之一,严重威胁人类健康。异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因突变常见于低级别胶质瘤及部分继发胶质母细胞瘤,且通常预后相对较好,已成为胶质瘤分子分型的重要指标。本研究拟在胶质瘤细胞 U87MG、SY5Y转染IDH1突变型(IDH1R132H)及野生型(IDH1wt)质粒,对其生物学行为变化进行探索,并建立了稳定表达IDH1R132H及IDH1wt的胶质瘤细胞株,为进一步研究IDH突变胶质瘤的临床特点及其可能分子机制奠定基础,从而为临床治疗及预测患者预后提供依据。<br> 方法:<br> 应用转染试剂将阴性对照、IDH1R132H及IDH1wt质粒转染入细胞,western blot法检测转染效率;CCK-8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力变化;划痕实验检测迁移能力变化;应用嘌呤霉素对细胞进行筛选,建立稳定过表达IDH1R132H及过表达IDH1wt的胶质瘤细胞株,并应用Western blot法进行验证。<br> 结果:<br> Western blot实验结果显示阴性对照、IDH1R132H及IDH1wt质粒已成功转染入胶质瘤细胞;CCK-8实验及克隆形成实验结果显示过表达IDH1R132H组细胞较对照组及过表达IDH1wt组增殖能力明显下降;细胞划痕实验结果显示过表达IDH1R132H组细胞迁移能力下降;经过嘌呤霉素筛选后,稳转株已建立成功,Western blot实验证实稳转株中已有带有FLAG标签的IDH蛋白表达。<br> 结论:<br> IDH1R132H突变型胶质瘤细胞的增殖能力、迁移能力均下降,提示IDH1R132H基因突变预示着低度恶性胶质瘤细胞。
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