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摘要文章主要从以下几部分进行论述：<br>　　第一部分 膳食干预对小鼠迷走传入神经内神经肽表达的影响<br>　　目的:<br>　　可卡因和安非他明调节转录肽(CART)是迷走传入神经内含量最丰富的神经肽,能够调节摄食行为.最近关于不同的膳食干预对迷走传入神经内神经肽的分布和表达水平的影响仍存在一定争议,本研究旨在探讨禁食及高脂饮食对小鼠迷走传入神经内神经肽表达的影响,为深入了解能量代谢的调控机制奠定基础.<br>　　方法:<br>　　本实验首先构建Nav1.8-Cre-ChR2-YFP具有自身荧光蛋白基因转基因小鼠,将Nav1.8-Cre-ChR2-YFP小鼠随机分成三组(即普通饲料组、禁食组、高脂饲料组)收集大脑、结状神经节及外周组织,通过免疫组化及激光共聚焦系统观察CART及MCH在结状神经节及大脑中的表达情况及在外周器官的分布情况,随后通过原位杂交技术检测大脑及迷走传入神经内CART及MCH神经肽的表达及分布情况.<br>　　结果:<br>　　本研究显示利用Nav1.8-Cre-ChR2-YFP转基因小鼠可荧光标记迷走传入神经C类纤维的胞体和轴突.在结状神经节中,大约82%的神经元共表达ChR2黄色荧光蛋白.此外,迷走复合体内ChR2-YFP标记的轴突清晰可见.大约55%的ChR2-YFP标记的神经元同时表达CART,研究发现普通饮食,禁食和肥胖小鼠结状神经节中的CART染色无明显差异.此外,空腹不诱导黑色素浓缩肽(MCH)在迷走神经传入表达.而且原位杂交检测显示禁食小鼠结状神经节也不表达prepo-MCH mRNA.<br>　　结论:<br>　　总的来说,本实验结果表明禁食和高脂饮食不影响CART和MCH在成年小鼠迷走传入神经的表达.<br>　　第二部分 迷走传入神经及TLR-4通路在脂多糖致炎症性厌食中的作用及其机制研究<br>　　目的:<br>　　本实验旨在研究迷走传入神经Nav1.8神经元(C类纤维)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的炎症性厌食中的作用及C类纤维内Toll样受体4(TLR4)通路对炎症性厌食的影响.<br>　　方法:<br>　　本实验使用Nav1.8-Cre-Tomato荧光报告小鼠标记迷走传入神经Nav1.8神经元(C类纤维),利用脂多糖诱导的厌食症小鼠模型,通过免疫荧光、激光共聚焦观察C类纤维在外周组织的分布及其与肠道免疫的联系.并使用双通道原位杂交技术,观察LPS诱导的厌食小鼠迷走传入神经内c-Fos的表达情况.通过观察Nav1.8敲除小鼠与对照小鼠的进食时间,进食量及体重变化情况,评价C类纤维在LPS引起炎症中的作用.此外,比较完全敲除TLR4的小鼠和仅在C类纤维表达TLR4的小鼠的摄食行为,探讨C类纤维内TLR4通路对LPS诱导的厌食的影响.<br>　　结果:<br>　　本实验表明迷走传入神经C类纤维可分布于内脏免疫细胞附近,腹腔注射LPS将激活迷走传入神经,其中结状神经节内C类纤维神经元中有约10%同时表达c-Fos和Nav1.8mRNA杂交信号.在缺乏C类纤维小鼠,LPS诱导的厌食效应明显延迟.此外,我们通过完全敲除TLR4的小鼠和仅在C类纤维的神经元表达TLR4的小鼠中,注射LPS并不能引发厌食和体重下降.<br>　　结论:<br>　　本研究表明,迷走神经C类纤维在脂多糖引起的炎症型厌食中的早期发挥着一定作用,不受C类纤维内TLR4表达的调节。