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摘要细胞核酸结合蛋白（CNBP）也称锌指蛋白9（ZNF9），其在脊椎动物中高度保守，以特定的序列方式结合DNA或RNA。它含有七个串联锌指重复序列，由Cys-X2-Cys-X4-His-X4-Cys的14个相同氨基酸组成。到目前为止，已经从人类、小鼠、大鼠、鸡、非洲爪蟾、蟾蜍、斑马鱼和银鲫中克隆了CNBP的cDNA。在低等脊椎动物中的研究数据表明，CNBP在睾丸中高度表达。然而，CNBP在哺乳动物睾丸中的定位和功能尚不明确。<br>　　为了全面了解CNBP在哺乳动物睾丸中的定位与功能机制，我们利用课题组已有的精原干细胞（SSCs）体外培养平台与生精小管体外培养平台研究了抑制CNBP表达后对新生小鼠睾丸发育和精子发生的影响。首先运用qRT-PCR与Western Blot技术发现在0天和7天小鼠睾丸中CNBP表达较高，从14天开始显著下降，并且在成年小鼠睾丸中CNBP表达非常低。免疫荧光染色发现CNBP定位于小鼠睾丸早期的生殖细胞和支持细胞。此结果提示CNBP是新生小鼠睾丸发育所必需的。进一步我们在体外培养的小鼠睾丸组织和精原干细胞（SSCs）中使用Morpholino对CNBP进行抑制表达。H&E染色和免疫荧光染色结果显示CNBP表达下降后，生精小管基膜结构紊乱，支持细胞定位错乱，生殖细胞凋亡以及间质细胞扩增。此外，在该研究中观察到抑制CNBP表达后引起小鼠睾丸中的WNT/β-catenin通路异常活化，而使用该通路的抑制剂XAV939进行干预可以对已有的表型进行挽救。为了观察CNBP抑制后引起的生殖细胞凋亡是直接效应还是间接效应，我们在体外培养的SSCs中使用Morpholino对CNBP进行抑制表达，结果显示SSCs正常生长。综上所述，CNBP通过调节支持细胞的Wnt/β-catenin通路来维持小鼠睾丸发育和精子发生。