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摘要世界范围内肺癌的发病率和死亡率均位于前列；其中非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer，NSCLC）是肺癌中主要的类型。由于NSCLC缺乏有效的早期诊断手段很多病例发现已处于晚期。早期诊断和早期治疗能够极大提高NSCLC患者五年生存率，如何寻找有效的分子标志物和分子治疗靶点是关键。miRNAs是一类长度为22-24个核苷酸的非编码单链小分子RNA；其可与靶基因结合从而抑制或促进肿瘤增殖浸润，从而发挥类似抑癌基因或癌基因作用。深入研究miRNA在肺癌发生发展中的作用，将为肺癌的诊治提供新的方向和靶点。<br>　　目的：<br>　　1．明确miR-202-3p在临床非小细胞肺癌中的表达情况，及其表达与病理类型、TNM分期及淋巴结转移等不同状况下的差异。<br>　　2．阐明miR-202-3p在体外细胞实验中对肺癌细胞株增殖的影响。<br>　　3．研究miR-202-3p的下游靶基因及信号通路；探讨miR-202-3p对非小细胞肺癌的作用机制。<br>　　方法：<br>　　1.qRT-PCR检测30例配对的非小细胞肺癌和癌旁组织标本中miR-202-3p的相对表达量，并作统计学分析比较差异。同时比较不同临床参数下：性别、年龄、病理类型、TNM分期及淋巴结转移情况下miR-202-3p相对表达率的差异性。<br>　　2.qRT-PCR检测人正常细胞株BEAS-2B、肺癌细胞A549和H292检测miR-202-3p的相对表达量。对肺癌细胞A549和H292细胞株进行转染miR-202-3pmimics使细胞过表达miR-202-3p，后通过MTT法、克隆形成实验、流式细胞仪等方法检测其上调对细胞增殖能力的影响。<br>　　3.通过在线软件进行预测miR-202-3p的靶基因；然后通过qRT-PCR，Western blot等方法验证靶基因mRNA及蛋白表达量的变化；Western blot法检测转染miR-202-3p mimics后，细胞株A549和H292中的靶基因MUC4下游信号因子p-HER-2、HER-2、p-ERK、ERK表达变化。用双荧光素酶报告基因检测直接对miR-202-3p的靶序列进行鉴定。<br>　　4.流式细胞仪检测各组细胞的凋亡发生率；Western blot检测经典凋亡标志物bcl-2和caspase-3的表达变化。<br>　　结果：<br>　　1．通过qRT-PCR检测收集的30对临床肺癌和癌旁正常组织标本，肺癌组织中的miR-202-3p表达率显著低于癌旁正常组织，两者之间有显著性差异（p＜0.05）。而不同临床参数：性别、年龄、病理类型、TNM分期及淋巴结转移情况下miR-202-3p相对表达率，结果未显示出显著性差异。<br>　　2．miR-202-3p在肺癌A549和H292细胞株中的表达与正常肺组织上皮细胞株BEAS-2B相比显著降低。体外转染miR-202-3p mimics进肺癌A549和H292细胞株中，促使miR-202-3p过度表达。MTT检测及克隆形成实验表明miR-202-3p过度表达抑制细胞增殖及细胞克隆形成。流式细胞仪检测显示与模拟组相比，用miR-202-3p mimics转染的A549细胞凋亡率显著提高。<br>　　3．在线软件的预测分析MUC4可能是miR-202-3p的靶基因。通过qRT-PCR和Western blot实验检测发现肺癌A549和H292细胞株在过表达miR-202-3p后，MUC4的mRNA和蛋白水平都显著下调。Western blot检测进一步发现转染miR-202-3p mimics后，细胞株A549和H292中的MUC4下游信号因子p-HER-2、HER-2、p-ERK表达亦显著降低。双荧光素酶报告基因检测证实MUC4是miR-202-3p的直接作用靶点，调控的作用序列存在于其3’-UTR中。<br>　　4．Western blot显示miR-202-3p转染显著抑制Bcl-2的表达和增加caspase-3因子的表达。实验提示miR-202-3p通过Bcl-2凋亡途径诱导细胞凋亡。<br>　　结论：<br>　　本研究提示miR-202-3p通过诱导细胞凋亡，对靶基因MUC4负性调节从而抑制非小细胞肺癌细胞增殖。因此miR-202-3p可能作为一种有效的抑癌基因在NSCLC中发挥作用。