检索历史 清除

摘要研究目的：机械通气(mechanical ventilation，MV)是急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS）患者在重症监护室及急诊室内不可替代的治疗手段之一。但机械通气本身不仅加重ARDS患者的肺损伤，增加其病死率；MV甚至会损伤正常的肺组织。由MV导致的肺损伤被称为机械通气相关性肺损伤（ventilator-induced lung injury，VILI），病理表现为肺组织损伤，肺水肿及肺部炎症。以往研究认为大潮气量机械通气才能导致急性肺损伤（acutelung injury，ALI），但最新的研究结果表明即便使用正常或小潮气量通气也会导致VILI的发生，特别是那些需要呼吸机支持的ARDS患者。由于机体的调控能力有限，对于ARDS患者使用近年来基于体外模肺和二氧化碳清除技术基础上提出的“超级肺保护性通气策略”，尽管可以轻度减轻VILI病理损伤评分，但并不能降低炎症因子的水平。因此，进一步研究VILI病理机制从而寻找合适的治疗靶点有着非常重要的临床意义。<br>　　长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一类RNA分子，长度大于200bp，但不具备蛋白编码功能。人们对lncRNAs的研究不断深入，研究表明lncRNAs具有多种的生物学功能，这主要包括通过分子骨架参与表观遗传的调控，监管mRNA加工，作为分子诱饵以及衍生肽段参与生物学作用等。此外，lncRNAs还可以基于序列配对发挥其调控作用；lncRNAs还可以通过特异性结合反应原件、序列转录后调节基因表达。通过这些功能，lncRNAs参与很多重要的生物学过程，如炎症反应、免疫调节、增殖及凋亡等，并导致多种疾病的发生发展，如关节炎、肿瘤、脑损伤等；部分lncRNAs成为相关疾病的治疗靶点之一。在呼吸系统中，lncRNAs表达于多种类型细胞中。但目前少有研究探讨VILI中lncRNAs的表达特点及其潜在的作用机制。<br>　　研究方法：本研究拟采用高通量测序技术分析机械通气相关性肺损伤小鼠肺组织lncRNAs和mRNAs表达谱，通过与对照组小鼠肺组织比较，应用生物信息学技术分析差异表达lncRNAs与mRNAs；通过lncRNAs-mRNAs共表达分析及RT-PCR等实验方法筛选出可能参与机械通气相关性肺损伤病理机制的lncRNA。针对筛选出的lncRNA，采用离体细胞及在体小鼠RNA干扰等实验技术，探讨了该lncRNA是否参与机械通气相关性肺损伤的病理过程及其潜在机制。<br>　　研究结果：高通量测序发现，在VILI小鼠的肺组织中共有104条lncRNAs表达显著变化，其中74条上调，30条下调。表达上调的lncRNAs中，RT-PCR再次证实机械通气后map2k3os显著上调。离体实验表明抑制lncRNA map2k3os表达可显著减少机械牵拉所致肺泡上皮细胞释放的炎症因子IL-1β及IL-6；在体实验同样显示抑制lncRNA map2k3os表达可显著减少机械通气所致小鼠肺组织炎症因子（IL-1β及IL-6）的释放，进而抑制炎症因子所致的肺水肿，降低血管通透性并缓解肺组织病理性损伤。<br>　　研究结论：通过本研究，可得到如下结论：<br>　　1、机械通气导致多个lncRNAs表达发生变化；<br>　　2、干扰lncRNA map2k3os显著降低机械通气所致的炎症因子释放，进而缓解炎症因子所致的肺损伤，表明map2k3os参与调控VILI生物伤的病理机制。