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摘要环境激素（estrogenic endocrine disruptors）是一类干扰动物体及人体内分泌功能并具有致癌、致畸、致突变作用的外源性物质，随着工业化和城市化进程发展的加快，排放到环境中的环境激素逐年增加，环境激素对机体健康的危害也受到越来越多的关注。双酚A（BPA）、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）、镉（Cd）普遍应用于现代工农业，与人们的日常生活密切相关，目前国内外关于三种物质毒性的研究，多是基于单一物质暴露的情况下进行的研究，从而忽略了通常情况下机体同时暴露于两种或两种以上的环境激素时对生物及人体健康产生的联合效应。本论文以研究BPA、DBP、Cd及其二元混合物的细胞毒性为目的，通过析因实验设计染毒方案，通过方差分析法分析二元混合物在增殖毒性、氧化应激毒性及遗传毒性上的联合效应，并探讨产生遗传毒性的机理。<br>　　目标物及其二元混合物对MCF-7细胞的增殖实验表明，BPA、DBP、Cd具有显著的增殖效应，其相对增殖效应分别为阳性对照组雌二醇（E2）的97.2%，88.3%和91.7%。增殖效应大小为：BPA＞Cd＞DBP。在二元混合物染毒条件下，BPA+DBP，BPA+Cd及DBP+Cd三种组合均具有更强的增殖效应。不同的二元混合物具有不同的联合作用类型，其中，BPA+DBP组合呈现协同作用，而BPA+Cd组合及DBP+Cd组合则呈现加和作用，此外，无论是单一染毒还是联合染毒，当目标物的浓度较高时，对MCF-7细胞均有明显的细胞毒性效应而非增殖效应。<br>　　目标物及其二元混合物对HepG2细胞的细胞存活率实验表明，BPA、DBP、Cd三种物质对HepG2细胞具有不同程度的细胞毒性，其细胞毒性大小为：Cd>BPA>DBP。与单一物质相比，BPA+DBP，BPA+Cd及DBP+Cd三种类型二元混合物具有更强的细胞毒性，并且BPA+DBP组合及DBP+Cd组合呈现协同效应，而BPA+Cd则表现为加和作用。<br>　　通过测定ROS含量、MDA含量及SOD酶活性研究目标物及其二元混合物对HepG2细胞的氧化损伤效应可知，BPA、DBP、Cd三种物质及其二元混合物对HepG2细胞造成氧化损伤，单独染毒条件下，Cd具有最强的氧化损伤效应，其ROS与MDA含量的最大值分别为空白组的1.4倍和2.2倍，而且SOD酶活性的最小值仅为空白组的43%。与单一物质相比，BPA+DBP，BPA+Cd及DBP+Cd三种组合具有更强的氧化损伤效应，其大小为：BPA+Cd＞DBP+Cd＞BPA+DBP。对于不同的检测指标，不同的二元混合物具有不同的联合作用类型，二元混合物对ROS含量及SOD酶活性的联合作用类型相同，BPA+DBP组合表现为加和作用，BPA+Cd及DBP+Cd则为协同效应，对于MDA含量的影响，三种二元混合物均为协同效应。<br>　　彗星试验表明，BPA、DBP、Cd三种物质对HepG2细胞均具有显著的DNA损伤效应，这可能是因为BPA、DBP、Cd均能导致细胞产生过度的氧化应激反应。单独染毒条件下，在染毒剂量低于10-6mol/L时，DNA损伤效应大小为BPA＞Cd＞DBP，而当染毒剂量高于10-6mol/L时则为Cd>BPA>DBP。这可能是因为较低浓度的Cd主要破坏DNA的修复机制，显示出的DNA较弱损伤效应，而在较高浓度时，Cd既能破坏DNA修复系统，又能通过氧化应激反应诱导DNA损伤，所以显示出较强的基因毒性。与单一物质相比，BPA+DBP，BPA+Cd及DBP+Cd三种类型三种组合具有更强的DNA损伤能力，对于不同的分析指标，不同的二元混合物具有不同的联合作用类型，其中，对于细胞尾部DNA百分比指标，BPA+DBP组合呈现协同作用，而BPA+Cd组合及DBP+Cd组合的联合作用类型为加和或协同。而对于尾长及尾距，三种组合均呈现明显的协同作用，所以对于细胞的遗传毒性，三种类型的二元混合物的联合作用类型为协同作用。<br>　　增殖试验，氧化损伤试验和彗星试验表明BPA、DBP、Cd三种物质及其二元混合物具有显著的细胞增殖效应，氧化损伤效应及遗传毒性，二元混合物的联合毒性效应更强，呈现加和或协同作用。