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摘要未分化型甲状腺癌（anaplastic thyroid carcinoma，ATC）虽仅占甲状腺癌发病率的2.0%，但因癌细胞侵袭性强，不具备摄碘能力而对常规131I治疗无效，5年生存率低于10%。介孔二氧化硅纳米粒(mesoporous silica nanoparticles，MSNs)药物提呈系统能增强抗肿瘤药物的靶向性，延缓药物释放，从而提高抗肿瘤药物的生物利用度，已广泛应用于癌症的靶向治疗中。检索国内外文献发现，VEGF(vascular endothelial growth factor)的表达与肿瘤形成密切相关，VEGF receptor(VEGFR)在ATC中呈过表达状态，抗VEGFR的靶向药物可以提高包括ATC在内的众多癌症的生存期。然而目前在ATC的治疗方面，采用131I标记并负载分子靶向药物的纳米载体来实现ATC双重靶向治疗（内照射与抗肿瘤）的报道鲜少。<br>　　目的：观察131I标记、anti-VEGFR2靶向性多功能MSNs[131I-牛血清白蛋白(BSA)-MSNs-anti-VEGFR2]在荷ATC瘤裸鼠体内的放射性分布，并探讨其与负载17-AAG和Torin2两种药物MSNs的抑瘤作用。<br>　　方法：（1）构建相应纳米载体，即MSNs、BSA-MSNs、BSA-MSNs-anti-VEGFR2及BSA-MSNs(17-AAG+Torin2)-anti-VEGFR2；采用透射电子显微镜（transmission electron microscope，TEM）观察各自形态，动态光散射（dynamic light scattering，DLS）测定各自粒径；建立17-AAG和Torin2的标准曲线，通过拟合方程得到载药纳米载体的载药量和包封率；采用氯胺T直接标记法进行131I标记得到相应纳米载体。<br>　　（2）MTS实验分析两种药物17-AAG和Torin2的相互作用。通过荧光共聚焦显微镜观察MSNs及MSNs-anti-VEGFR2在两种ATC细胞系ARO及FRO细胞的靶向性结合及细胞摄取情况；通过细胞摄碘实验观察Na131I、131I-BSA-MSNs和131I-BSA-MSNs-anti-VEGFR2在胞内的存留时间。<br>　　（3）在动物水平实验中，制备FRO荷瘤裸鼠，分别于瘤体内注射131I-BSA-MSNs-anti-VEGFR2（靶向组）、131I-BSA-MSNs（非靶向组）、Na131I组、131I-BSA-MSNs(17-AAG+Torin2)-anti-VEGFR2（靶向+载药组）和生理盐水（对照组）。通过SPECT/CT显像观察不同时间荷瘤裸鼠体内的放射性分布；使用γ计数仪测定并计算注药24h、72h后Na131I组、靶向组及非靶向组中正常组织器官和瘤体每克组织注射剂量百分比（%ID/g）；以注药前荷瘤裸鼠的体重及瘤体体积为基准，记录各组在整个观察期（30天）内的体重及瘤体体积变化；采用Log-rank法对各组裸鼠生存分析；实验结束时对各组荷瘤裸鼠的主要器官及瘤体进行组织病理检查，并对对照组的瘤体进行免疫组化来检测肿瘤VEGFR2的表达情况。<br>　　结果：（1）成功构建了所需的纳米载体MSNs、BSA-MSNs、BSA-MSNs-anti-VEGFR2及BSA-MSNs(17-AAG+Torin2)-anti-VEGFR2。TEM显示载体的形貌均为球形，且形态规整；DLS测得粒径分布范围均较窄，上述载体平均粒径分别为108、139、163、159nm，zeta平均电位分别为-23.91、45.53、28.45、-1.83mV，BSA-MSNs-anti-VEGFR2对17-AAG和Torin2的载药量分别为7%和6%，包封率分别为87%和85%。131I标记率为50%–75%，放化纯为95%-98%。<br>　　（2）细胞水平实验中，两药的细胞毒性实验显示17-AAG与Torin2药物浓度在0.1-5μM之间时，随浓度增加，对ATC细胞的抑制率也逐渐增加；当药物浓度＞1μM时，随浓度增加，细胞抑制率的增幅趋于平缓。17-AAG和Torin2与细胞共同作用48h后，两药浓度比为1：1或2：1时，对ATC细胞的杀伤性相当（IC50分别为0.33μM、0.26μM）。<br>　　荧光共聚焦显微镜实验显示MSNs-anti-VEGFR2和MSNs均可明显被FRO及ARO肿瘤细胞吞噬。细胞对核素纳米载体的定量摄取实验显示FRO及ARO细胞对131I标记的纳米载体呈动态摄取；孵育3h后，两细胞对靶向组的摄取程度均高于非靶向组（均P＜0.01）。<br>　　（3）动物水平实验中，SPECT/CT显示，注药后1-3周，靶向组瘤体内放射性计数均高于非靶向组（t值分别为8.81、7.06、12.78，均P＜0.05）。组织分布实验显示，靶向组瘤体24h及72h的每克组织注射剂量百分比（32.2±2.8%ID/g、23.0±1.8%ID/g）均明显高于非靶向组（26.1±2.5%ID/g、12.3±1.2%ID/g）（t分别为2.81、8.57，P分别为0.04、0.001）。治疗后30天，①Na131I组、对照组和非靶向组的瘤体体积较治疗前增加，分别变为基准体积的395.0±22.5%、405.0±24.1%和198.7±13.2%；靶向组较治疗前未见明显变化（为基准体积的101.1±2.4%）；而靶向+载药组的瘤体体积有所减小（减为基准体积的94.1±8.2%）。②Na131I组、对照组的裸鼠体重较治疗前明显减少，分别变为基准体重的88.6±3.0%和86.2±3.1%；非靶向组较治疗前未见明显变化（为基准体重的102.1±3.1%）；而靶向组和靶向+载药组的裸鼠体重较治疗前有所增加，分别增为基准体积的116.2±3.4%和123.1±3.2%。③生存分析曲线显示，上述各组的中位生存期分别为27、25、34、38和46天，Log-rank分析显示靶向+载药组和靶向组的中位生存期均较非靶向组延长(P分别为＜0.001、0.0047)，并且靶向+载药组较靶向组更长(P＜0.001)。④病理切片HE染色显示，治疗结束后各组荷瘤裸鼠的主要器官（心、肝、脾、肾及肺）的组织形态学均未见明显异常；非靶向组、靶向组及靶向+载药组可见肿瘤细胞片状坏死，以靶向组和靶向+载药组更为明显。肿瘤免疫组化证实FRO肿瘤细胞表面高表达VEGFR2。<br>　　结论：131I标记的两种纳米载体131I-BSA-MSNs-anti-VEGFR2和131I-BSA-MSNs对人未分化型甲状腺癌移植瘤具有明显的抑制作用，且负载药物17-AAG和Torin2后能更有效地延长荷瘤裸鼠的生存期。本实验为靶向治疗ATC提供了实验支持，拓展了新思路。