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摘要目的：本实验构建含qnr基因的实验菌株，通过测定实验菌株的最低抑菌浓度、防突变浓度和适应性代价，探讨qnr基因对细菌喹诺酮类耐药突变选择窗以及细菌适应性代价的影响。<br>　　方法：<br>　　1、采用TA克隆等分子生物学方法构建含qnr基因的重组菌株作为本实验的实验对象，并通过蓝白筛选原理确定目的菌株。<br>　　2、采用琼脂稀释法检测各实验菌株的喹诺酮类药物的最低抑菌浓度（MIC）和防突变浓度（MPC），并计算突变选择窗（MSW）和防突变指数（MPI）。<br>　　3、采用肉汤培养法测定实验菌株的生长曲线，了解各实验菌株在不同时期的生长特点。<br>　　4、采用肉汤共培养法对E. coli TOP10 qnrA/E. coli TOP10 pGMT、E. coli TOP10 qnrB/E. coli TOP10 pGMT、E. coli TOP10 qnrS/E. coli TOP10 pGMT三组菌株进行体外竞争试验；三株E. coli TOP10 qnr菌株之间进行体外竞争试验和体外交叉抑制实验，分析在同一环境下的生长优劣情况和适应性代价。<br>　　5、采用肉汤培养法进行喹诺酮类药物对三株重组菌株E. coli TOP10 qnr体外杀菌实验，分析喹诺酮类药物的体外杀菌效果，并描绘时间-杀菌曲线。<br>　　结果：<br>　　1、本研究中，萘啶酸对E. coli TOP10 qnr重组菌的最低抑菌浓度（MIC）范围为4-8?g/ml，左氧氟沙星的MIC为0.125?g/ml，环丙沙星的MIC为0.0625-0.125?g/ml，诺氟沙星的MIC为0.125-0.25?g/ml，莫西沙星的MIC为0.125-0.25?g/ml。<br>　　2、萘啶酸对E. coli TOP10 qnr重组菌的防突变浓度（MPC）范围为32-64?g/ml，左氧氟沙星为0.5-1?g/ml，环丙沙星为0.25-0.5?g/ml，诺氟沙星为0.5-2?g/ml，莫西沙星为0.25-1?g/ml。喹诺酮类药物对E. coli TOP10 qnr菌的防突变指数范围在2-8。<br>　　3、从生长曲线中看，各菌株进入对数生长期的时间在3 h左右，约在11 h进入稳定期，OD 值随着培养时间的延长而增大，即细菌数随着培养时间的延长而增多，生长曲线无统计学差异（P>0.05）。<br>　　4、E. coli TOP10 qnrA菌株、E. coli TOP10 qnrB菌株、E. coli TOP10 qnrS菌株和E. coli TOP10 pGMT菌株竞争试验的适应性代价分别为1.030、1.056和1.016，各菌株间无统计学意义（P>0.05）。<br>　　5、E. coli TOP10 qnrA菌株和E. coli TOP10 qnrB菌株体外竞争试验产生的适应性代价为1.002，E. coli TOP10 qnrB菌株和E. coli TOP10 qnrS菌株为1.064，E. coli TOP10 qnrA 菌株和 E. coli TOP10 qnrS 菌株为 0.939，以上差异有统计学意义（P<0.05）。<br>　　6、在体外交叉性竞争试验中，E. coli TOP10 qnrA菌株与E. coli TOP10 qnrS菌株之间可能产生一定的交叉抑制作用。<br>　　7、当喹诺酮类药物在0.5?MIC和1?MIC时，抗菌药物抑菌作用不是很显著，在2?MIC浓度时，有较明显的杀菌效果，随药物浓度的增加，其杀菌能力逐渐增强。<br>　　结论：<br>　　1、qnr 基因能降低细菌对喹诺酮类药物的敏感性，不同类型的 qnr 基因对氟喹诺酮类的药物敏感性不一，属于低水平性耐药；<br>　　2、qnr 基因能相对增加细菌的防突变浓度，使突变选择窗的范围增宽，三种 qnr基因增加细菌喹诺酮耐药突变选择窗的范围没有明显差别；<br>　　3、qnr基因对细菌的生长并无明显影响，qnr基因对细菌不产生适应性代价，qnrA菌株与qnrS菌株之间产生了低适应性代价，二者可能产生比较弱的竞争性关系，生长和竞争上的优势可能导致qnrS菌株在同一环境下处于优势克隆菌群的地位。