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摘要目的：心力衰竭是许多心血管疾病不可逆转进程中的终末阶段，而心肌重构是心力衰竭的主要的重要的病理变化之一。心室重构过程中心肌细胞肥大及心肌纤维化是其主要的病理形态改变。如何终止心肌细胞肥厚以及功能的改变，对于心室重构的治疗都具有重要的意义。miRNA是一类由miRNA基因编码的，不编码蛋白质、长度约21个碱基的RNA单链，普遍参与细胞生理病理状态的调节，对细胞功能的维持发挥重要作用。在心肌肥厚的过程中， miR-26a-5p被发现存在表达差异，这为我们选择miR-26a-5p提供了理论依据，探讨其对心肌细胞的调控作用。通过靶基因预测软件预测miR-26a-5p可能是通过调节靶基因ULK1发挥作用，为探索其中的分子调控机制提供了思路。关于miR-26a-5p与ULK1以及自噬活性的变化的研究尚少，所以本研究将miR-26a-5p通过靶向ULK1基因来的调控自噬活性作为重点，进一步研究miR-26a-5p对于心肌肥厚的分子调控机制，为延缓乃至逆转心脏肥厚提供新的方向。<br>　　方法：选择Sprague Dawley大鼠新生1~3天的乳鼠，取出心脏的心室部，用组织块胰酶消化法消化心室组织，根据心肌细胞与心肌成纤维细胞贴壁时间的差异分离纯化出心肌细胞，接种于6孔板中，在显微镜下观察细胞形态。细胞培养24h，利用脂质体转染法将miR-26a-5p mimic和inhibitor及其各自的对照转入心肌细胞中， 48h后提取细胞RNA和总蛋白，用实时荧光定量PCR法检测miR-26a-5p、ULK1 mRNA相对表达；用Western blot法检测ULK1、LC3、自噬相关蛋白p62的表达水平；用流式细胞学法检测自噬相关蛋白LC3的表达；用透射电镜检测细胞中自噬小泡的形成；<br>　　结果：分离得到的原代心肌细胞，细胞贴壁后呈圆形或者肾形，具有自主搏动；一定浓度的Ang II可刺激心肌细胞肥大，肥厚相关基因表达增加，同时诱导ULK1的表达和自噬活性的增加；ULK1 siRNA干扰ULK1的表达能够减轻由Ang II介导的心肌细胞自噬活性增加和肥大加剧。miR-26a-5p mimic和inhibitor可以很好地模拟miR-26a-5p过表达和缺失的情况；随着miR-26a-5p表达改变，ULK1基因在转录和蛋白水平也随之发生变化；心肌细胞转染miR-26a-5p mimic后，LC3 II/I蛋白表达减少、自噬相关蛋白P62表达增加；反之转染inhibitor的细胞，LC3 LC3 II/I蛋白表达上升、自噬相关蛋白P62表达减少，提示在体外Ang II诱导心肌细胞的中， miR-26a-5p可抑制自噬活性。<br>　　结论：在原代心肌细胞中，miR-26a-5p可以调控Ang II 诱导的心肌细胞肥大，而其调控的作用机制是通过抑制自噬通路上ULK1蛋白的表达来影响细胞功能，进一步调节心肌细胞自噬活性，进而发挥调节心脏肥厚的作用。